蜡梅几丁质酶基因的克隆与原核表达

蜡梅几丁质酶基因的克隆与原核表达

在构建好蜡梅花cDNA文库并进行EST分析基础上,通过随机克隆测序,得到1个蜡梅几丁质酶的cDNA基因,命名为Cpchia（GenBank登录号：FJ749130）。CpchiacDNA全长为1184bp,开放阅读框为954bp,编码317个氨基酸,其结构包括信号肽、几丁质结合域、可变交联区、催化区,无C端延伸区,为ClassⅠb型胞外几丁质酶,属于几丁质酶第19家族。将Cpchia克隆到原核表达载体pET-28a（＋）,在大肠杆菌BL2l细胞中以包涵体形式表达融合蛋白,利用透析法获得复性蛋白,其几丁质酶活性经DNS法检测达到200U.mL-1。酶活性和稳定性分析表明,试验条件下,pH7.0有...

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Veröffentlicht in:Linye kexue (1979) 2009, Vol.45 (12), p.36-41
1. Verfasser: 谢树章 秦平伟 张迷 胡雨晴 李名扬 眭顺照
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
克隆
几丁质酶
原核表达
蜡梅
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