鞘氨醇激酶1(Sphk1)抑制剂在肝纤维化大鼠模型中的作用机制

目的 探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)抑制剂在不同肝纤维化大鼠模型中的治疗作用.方法 170 只SD大鼠随机分为4 组:正常组(30 只)、HFE组(给予高脂乳剂,45 只)、CCl4 组(CCl4 诱导,45 只)、CCl4+HFE组(HFE联合CCl4,50 只),经病理及实验室检查证实造模成功后,分别给予SphK1 抑制剂PF-543,同组别以生理盐水作为对照,分别在第1、7、14 天取肝组织进行Masson染色,比较肝纤维化面积占比、透射电镜下观察自噬小体形成情况、Real-time PCR检测肝纤维化及自噬相关标志物mRNA表达水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较...

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Veröffentlicht in:临床肝胆病杂志 2023, Vol.39 (8), p.1886-1894
Hauptverfasser: 王燕, 马丽, 肖雄, 雷冬梅, 赵奉茹, 郭力源, 王晓忠
Format: Artikel
Sprache:chi
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description 目的 探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)抑制剂在不同肝纤维化大鼠模型中的治疗作用.方法 170 只SD大鼠随机分为4 组:正常组(30 只)、HFE组(给予高脂乳剂,45 只)、CCl4 组(CCl4 诱导,45 只)、CCl4+HFE组(HFE联合CCl4,50 只),经病理及实验室检查证实造模成功后,分别给予SphK1 抑制剂PF-543,同组别以生理盐水作为对照,分别在第1、7、14 天取肝组织进行Masson染色,比较肝纤维化面积占比、透射电镜下观察自噬小体形成情况、Real-time PCR检测肝纤维化及自噬相关标志物mRNA表达水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验.相关性分析采用Spearman相关分析.结果 与正常组(0.57±0.13)相比,CCl4 组(6.93±5.81)和HFE+CCl4 组(10.89±2.67)肝纤维化面积占比均升高(P值均<0.01).PF-543 干预第7 天可显著降低CCl4 组及HFE+CCl4 组纤维化病变面积(P值均<0.01).与正常组相比,HFE组、CCl4 组和HFE+CCl4 组的SphK1 表达水平均明显降低(P值均<0.01),HFE+CCl4 组的α平滑肌肌动蛋白、转化生长因子-β、α1-Ⅰ型胶原mRNA表达水平均明显升高(P值均<0.01),干预后各指标水平无明显变化(P值均>0.05).Atg5、Atg12、Becn1 的表达水平与肝纤维化病变面积均呈负相关(r分别为-0.715、-0.640、-0.632,P值均<0.01);SphK1 的表达水平与Atg5、Atg12、Becn1、Map1lc3a 的mRNA表达均呈正相关(r分别为0.603、0.561、0.510、0.498,P值均<0.01).电镜示:CCl4 组肝组织轻微水肿,细胞器丰富,轻度肿胀,以粗面内质网扩张为主.该视野可见 9 个自噬溶酶体结构.在PF-543 干预第7 天后,未见典型自噬结构.HFE+CCl4 组肝组织轻度水肿,结构不清晰,粗面内质网数量丰富,明显扩张,表面附着核糖体颗粒较少.该视野可见 6 个自噬溶酶体结构.在PF-543 干预第 7 天后,该视野未见典型自噬结构.结论 PF-543 对自噬有显著抑制作用,并同时伴有纤维化面积的减少.提示靶向SphK1,可影响到肝脏的自噬水平,并进而缓解两种肝纤维化模型的纤维化状态.
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