腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体的构建

腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体的构建

S6; [目的] 构建以甘露糖为筛选剂的抗旱、抗盐碱植物表达载体,进一步选育无标记的抗逆作物品种.[方法]利用腊梅花水通道蛋白CpTIP cDNA和大肠杆菌pmi基因构建植物表达载体,将抗逆基因与甘露糖正向选择系统结合.pmi基因植物表达载体（pPMI）的构建：用XhoⅠ酶切植物表达载体pCAMBIA2301,切除Kan基因,并用CIP酶进行去磷酸化,然后与XhoⅠ酶切后PCR产物连接转化.腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体（pPMI::CpTIP）的构建：用KpnⅠ和XbaⅠ酶切pPMI植物表达载体和克隆载体,并将酶切后pmi植物表达载体与腊梅花水通道蛋白CpTIP基因...

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Veröffentlicht in:农业科学与技术（英文版） 2009, Vol.10 (5), p.82-84
Hauptverfasser: 成瑜, 刘昭军, 刘丽艳, 李铁, 赵曦
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:S6; [目的] 构建以甘露糖为筛选剂的抗旱、抗盐碱植物表达载体,进一步选育无标记的抗逆作物品种.[方法]利用腊梅花水通道蛋白CpTIP cDNA和大肠杆菌pmi基因构建植物表达载体,将抗逆基因与甘露糖正向选择系统结合.pmi基因植物表达载体（pPMI）的构建：用XhoⅠ酶切植物表达载体pCAMBIA2301,切除Kan基因,并用CIP酶进行去磷酸化,然后与XhoⅠ酶切后PCR产物连接转化.腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体（pPMI::CpTIP）的构建：用KpnⅠ和XbaⅠ酶切pPMI植物表达载体和克隆载体,并将酶切后pmi植物表达载体与腊梅花水通道蛋白CpTIP基因连接转化.转化鉴定均按Sambrook等的方法进行.[结果]成功构建了腊梅花水通道蛋白CpTIP 基因甘露糖筛选体系植物表达载体pPMI::CpTIP.[结论]所构建的载体结合了抗逆基因和甘露糖正向选择系统的优点,将抗逆基因与环境友好型筛选体系很好的结合起来.
ISSN:1009-4229
DOI:10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.05.020