氯马斯汀对急性辐射损伤后OPCs细胞分化和髓鞘形成的影响

氯马斯汀对急性辐射损伤后OPCs细胞分化和髓鞘形成的影响

Q691.9; 构建大鼠辐射损伤模型,蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)检测髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)表达,从SD大鼠中分离原代少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cells,OPCs)和神经元细胞,并通过免疫荧光检神经丝蛋白(Neurofilament protein,NF)和OPCs标志蛋白硫酸软骨素蛋白多糖(Chondroitinsulphate peoteoglycan,CSPGs/NG2)的表达以鉴定分离的原代细胞.CCK8(Cell counting kit-8)实验用于检测不同浓度的氯马斯汀对O...

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Veröffentlicht in:辐射研究与辐射工艺学报 2021-10, Vol.39 (5), p.47-54
Hauptverfasser: 王艳艳, 常凯, 刘晨霞, 那琬琳, 江忠勇, 熊杰
Format: Artikel
Sprache:chi
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常凯
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description Q691.9; 构建大鼠辐射损伤模型,蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)检测髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)表达,从SD大鼠中分离原代少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cells,OPCs)和神经元细胞,并通过免疫荧光检神经丝蛋白(Neurofilament protein,NF)和OPCs标志蛋白硫酸软骨素蛋白多糖(Chondroitinsulphate peoteoglycan,CSPGs/NG2)的表达以鉴定分离的原代细胞.CCK8(Cell counting kit-8)实验用于检测不同浓度的氯马斯汀对OPCs细胞增殖的影响.通过慢病毒构建5组毒蕈碱型受体(Muscarinic cholinergic receptor,CHMR)干扰表达载体,并通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和WB检测转染效率.此外,为探究氯马斯汀对OPCs细胞分化和髓鞘形成的影响,通过WB和免疫荧光检测MBP和OLs表达少突胶质细胞系转录因子2(Oligodendrocyte lineage transcription factor 2,Olig 2)的表达.结果表明,氯马斯汀能够促进大鼠MBP形成,抑制OPCs细胞增殖,且具有浓度效率.与对照组相比,CHRM1-CHRM 5干扰均显著降低了mRNA和蛋白的表达水平,其中CHRM2干扰效率最佳.与对照组相比,CHRM2干扰显著促进了MBP的表达,而氯马斯汀处理后进一步促进了MBP的表达;此外,免疫双荧光结果与上述推论一致,CHRM2干扰显著促进了MBP和OLIG2的表达,而氯马斯汀处理进一步的促进了MBP和OLIG2的表达.氯马斯汀促进OPCs细胞分化和髓鞘形成.
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