脱细胞猪心包膜生物相容性及成骨性能的体内外评价

R783.1; 目的:体外检测作为引导性骨再生术(guided bone regeneration,GBR)屏障膜的脱细胞猪心包膜(acellular porcine pericardium,APP)的形貌特性及生物相容性.建立动物模型,检测其体内屏障软组织长入骨缺损的作用及对促成骨的影响.方法:扫描电镜检测APP膜的超微结构.细胞增殖检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验检测人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell,hBMSCs)接种于APP膜后第1、3、7天细胞增殖情况;接种后第5天,通过鬼笔环肽+ DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole)对细胞骨架及细胞核进行染色,观察hBMSCs的增殖及黏附情况.体内实验建立3只比格犬、18个实验位点的牙槽嵴保存动物实验模型,随机分入APP组(拔牙窝内植入Bio-Oss(R)骨粉并覆盖APP膜)、BG组(拔牙窝内植入Bio-Oss(R)骨粉并覆盖Bio-Gide(R)膜)和空白组(自然愈合),术后4周和12周进行Micro-CT扫描检测各组成骨情况,脱钙后进行HE染色,组织学观察各组愈合情况.结果:扫描电镜下APP膜具有致密及疏松双层非对称及三维多孔超微结构.体外实验证实APP膜可以促进hBMSCs的增殖及黏附,在接种后第7天APP组细胞数量显著高于BG组(P＜0.05).体内实验拔牙窝整体成骨情况:术后4周,3组新生骨比例差异无统计学意义(P＞0.05);术后12周,APP组、BG组间新生骨比例差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于空白组(P＜0.05).冠方成骨情况:术后4周,APP组及BG组膜下方成骨显著高于空白组(P＜0.05),组间差异无统计学意义(P＞0.05);术后12周,APP组及BG组膜下方成骨显著高于空白组(P＜0.05),组间差异有统计学意义(P＜0.05).颊侧骨嵴顶相对吸收量表明:术后4周,APP组显著低于空白组(P＜0.05),BG组低于空白组,差异无统计学意义(P＞0.05);术后12周,各组颊侧骨嵴顶继续降低,APP组相对吸收量仍显著低于空白组(P＜0.05),BG组低于空白组,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:APP膜具有良好的三维结构及细胞相容性,其在GBR中起到良好屏障软组织效果的同时,能够显著促进膜下方成骨及减少颊