Expression of thymic stromal lymphopoietin in canine atopic dermatitis

Background –  In humans, thymic stromal lymphopoietin (TSLP) plays a central role in the development of allergic inflammation, such as atopic dermatitis (AD), but it is unknown whether it is involved in the pathogenesis of canine AD (CAD). Hypothesis/Objectives –  Our aim was to characterize canine...

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Veröffentlicht in:Veterinary dermatology 2013-02, Vol.24 (1), p.54-e14
Hauptverfasser: Klukowska-Rötzler, Jolanta, Chervet, Ludovic, Müller, Eliane J., Roosje, Petra, Marti, Eliane, Janda, Jozef
Format: Artikel
Sprache:eng
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creator Klukowska-Rötzler, Jolanta
Chervet, Ludovic
Müller, Eliane J.
Roosje, Petra
Marti, Eliane
Janda, Jozef
description Background –  In humans, thymic stromal lymphopoietin (TSLP) plays a central role in the development of allergic inflammation, such as atopic dermatitis (AD), but it is unknown whether it is involved in the pathogenesis of canine AD (CAD). Hypothesis/Objectives –  Our aim was to characterize canine TSLP and to assess its expression in CAD. Methods –  Canine TSLP was identified based on sequence homology with human TSLP and the complementary DNA (cDNA) cloned by RT‐PCR. Real‐time quantitative RT‐PCR was established to assess the expression of canine TSLP in cultured canine keratinocytes and in skin biopsy specimens from lesional and nonlesional skin of 12 dogs with CAD and eight healthy control dogs. Results –  Partial canine TSLP cDNA was cloned and characterized. It contained four exons that shared 70 and 73% nucleotide identity with human and equine TSLP, respectively, encoding the signal peptide and full‐length secreted protein. We found significantly increased TSLP expression in lesional and nonlesional skin of dogs with CAD compared with healthy control dogs (P 
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Hypothesis/Objectives –  Our aim was to characterize canine TSLP and to assess its expression in CAD. Methods –  Canine TSLP was identified based on sequence homology with human TSLP and the complementary DNA (cDNA) cloned by RT‐PCR. Real‐time quantitative RT‐PCR was established to assess the expression of canine TSLP in cultured canine keratinocytes and in skin biopsy specimens from lesional and nonlesional skin of 12 dogs with CAD and eight healthy control dogs. Results –  Partial canine TSLP cDNA was cloned and characterized. It contained four exons that shared 70 and 73% nucleotide identity with human and equine TSLP, respectively, encoding the signal peptide and full‐length secreted protein. We found significantly increased TSLP expression in lesional and nonlesional skin of dogs with CAD compared with healthy control dogs (P &lt; 0.05), whereas no difference was measured between lesional and nonlesional samples. In cultured primary canine keratinocytes, we found increased TSLP expression after stimulation with house dust mite allergen extract or Toll‐like receptor ligands lipopolysaccharide and poly I:C. Conclusions and clinical importance –  Increased TSLP expression in the skin of dogs with CAD supports an involvement of TSLP in the pathogenesis of CAD similar to that in humans. Further studies should elucidate the function and therapeutic potential of TSLP in CAD. Résumé Contexte –  Chez l’homme, la TSLP (thymic stromal lymphopoietin) joue un rôle central dans le développement de l’inflammation allergique, telle que la dermatite atopique (AD), mais nous ne savons pas si elle est impliquée dans la pathogénie de la dermatite atopique canine (CAD). Hypothèse / objectifs –  Notre objectif est de caractériser la TSLP canine et d’évaluer son expression dans la CAD. Méthodes –  La TSLP canine a été identifiée par homologie de séquence avec la TSLP humaine et de l’ADN complémentaire (ADNc) clonée par RT‐PCR. La RT‐PCR quantitative en temps réel a étéétablie afin d’évaluer l’expression de la TSLP canine dans les kératinocytes canins en culture et dans les biopsies de peaux lésionnelles et non lésionnelles de 12 chiens avec CAD et huit chiens de contrôle sains. Résultats –  L’ADNc partielle de TSLP canine a été cloné et caractérisé. Il contient quatre exons qui partagent respectivement 70 et 73 % d’identité nucléotidique avec la TSLP humaine et équine, codant pour le peptide signal et la protéine sécrétée intégrale. Nous avons trouvé une expression de TSLP significativement accrue dans la peau lésionnelle et non‐lésionnelle des chiens avec CAD par rapport aux chiens témoins sains (P &lt; 0.05), alors qu’aucune différence n’a été mesurée entre les échantillons lésionnels et non‐lésionnels. Dans les kératinocytes canins primaires en culture, nous avons trouvé une expression de TSLP accrue après stimulation avec les extraits d’allergènes d’acariens de poussière de maison ou les lipopolysaccharides ligands du Toll‐like recepteur et poly I:C. Conclusions et importance clinique –  L’expression augmentée de TSLP dans la peau des chiens avec CAD supporte la participation de la TSLP dans la pathogénie de la CAD, semblable à celle de l’homme. De plus amples études devraient élucider la fonction et le potentiel thérapeutique de la TSLP dans la dermatite atopique canine. Resumen Introducción –  en seres humanos, la linfopoietina tímica del estroma (TSLP) juega un papel central en el desarrollo de la inflamación alérgica, como en dermatitis atópica (AD), pero se desconoce si juega un papel en la patogenia de la AD canina (CAD). Objetivos del / de la hipótesis –  nuestro propósito fue caracterizar la TSLP canina y determinar su expresión en casos de CAD. Métodos –  se identificó la TSLP canina basado en la homología de la secuencia con la TSLP humana y el DNA complementario (cDNA) fue clonado mediante RT‐PCR. Se preparó RT‐PCR cuantitativa en tiempo real para determinar la expresión de la TSLP canina en queratinocitos caninos cultivados y en biopsias de piel con lesiones y sin lesiones de 12 perros con CAD y de ocho perros sanos como control. Resultados –  se clonó y caracterizó parcialmente el cDNA de la TSLP. Tenia cuatro exones que compartieron un 70 y un 73% de homologia en nucleótidos con la TSLP humana y equina, respectivamente, codificando el péptido de señal y la proteína secretada completa. Encontramos una expresión mayor de TSLP en la piel con y sin lesiones de perros con CAD comparado con los perros sanos control (P &lt; 0,05), mientras que no se observó ninguna diferencia entre las muestras con y sin lesiones. En queratinocitos caninos primarios cultivados, encontramos una expresión creciente de la TSLP después del estímulo con el extracto alergénico del ácaro del polvo de la casa o con los ligandos de los receptores equivalentes a Toll lipopolisacarido y poli I:C. Conclusiones e importancia clínica –  la expresión creciente de TSLP en la piel de perros con CAD sugiere un papel de la TSLP en la patogenia de la CAD, similar a lo que sucede en seres humanos. Otros estudios deben aclarar la función y el potencial terapéutico de la TSLP en casos de CAD. Zusammenfassung Hintergrund –  Beim Menschen spielt das thymische stromale Lymphopoietin (TSLP) eine zentrale Rolle bei der Entwicklung allergischer Entzündung, wie zum Beispiel bei atopischer Dermatitis (AD), aber es ist nicht bekannt, ob es auch bei der Pathogenese der caninen AD (CAD) eine Rolle spielt. Hypothese /Ziele –  Unser Ziel war eine Beschreibung des caninen TSLP vorzunehmen und seine Exprimierung bei der CAD festzustellen. Methoden –  Canines TSLP wurde mittels Sequenzhomologie mit humanem TSLP identifiziert und die komplementäre DNA (cDNA) mittels RT‐PCR geklont. Ein Real‐time quantitativer RT‐PCR wurde entwickelt, um die Exprimierung des caninen TSLP in kultivierten caninen Keratinozyten und in Proben aus Hautbiopsien läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von 12 Hunden mit CAD und acht gesunden Kontrollhunden zu erfassen. Ergebnisse –  Eine partielle TSLP cDNA wurde geklont und charakterisiert. Dieser Teil beinhaltete vier Exons, welche mit dem humanen TSLP zu 70% und mit dem equinen TSLP zu 73% ident waren und das Signalpeptid und das sezernierte Protein in voller Länge kodierten. Wir stellten eine signifikant erhöhte TSLP Exprimierung in läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von Hunden mit CAD fest im Vergleich zu gesunden Kontrollhunden (P &lt; 0,05), während wir zwischen Proben aus Läsionen und normaler Haut keine Unterschiede feststellen konnten. In kultivierten primären caninen Keratinozyten fanden wir eine erhöhte TSLP Exprimierung nach einer Stimulation mit Hausstaubmilbenextrakt oder Lipopolysacchariden der Toll‐like Rezeptorliganden und Poly I:C. Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung –  Eine erhöhte TSLP Exprimierung in der Haut von Hunden mit CAD unterstützt die Hypothese der Beteiligung von TSLP bei der Pathogenese von CAD, ähnlich wie beim Menschen. Weitere Studien sollten das funktionelle und therapeutische Potential von TSLP bei der CAD beleuchten.</description><identifier>ISSN: 0959-4493</identifier><identifier>EISSN: 1365-3164</identifier><identifier>DOI: 10.1111/j.1365-3164.2012.01096.x</identifier><identifier>PMID: 23331680</identifier><language>eng</language><publisher>Oxford, UK: Blackwell Publishing Ltd</publisher><subject>Amino Acid Sequence ; Animals ; Base Sequence ; Cloning, Molecular ; Cytokines - genetics ; Cytokines - metabolism ; Dermatitis, Atopic - metabolism ; Dermatitis, Atopic - pathology ; Dermatitis, Atopic - veterinary ; Dog Diseases - metabolism ; Dogs ; Female ; Gene Expression Regulation - physiology ; Male ; Molecular Sequence Data ; Real-Time Polymerase Chain Reaction - methods ; Real-Time Polymerase Chain Reaction - veterinary</subject><ispartof>Veterinary dermatology, 2013-02, Vol.24 (1), p.54-e14</ispartof><rights>2013 The Authors. Veterinary Dermatology © 2013 ESVD and ACVD</rights><rights>2013 The Authors. 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Hypothesis/Objectives –  Our aim was to characterize canine TSLP and to assess its expression in CAD. Methods –  Canine TSLP was identified based on sequence homology with human TSLP and the complementary DNA (cDNA) cloned by RT‐PCR. Real‐time quantitative RT‐PCR was established to assess the expression of canine TSLP in cultured canine keratinocytes and in skin biopsy specimens from lesional and nonlesional skin of 12 dogs with CAD and eight healthy control dogs. Results –  Partial canine TSLP cDNA was cloned and characterized. It contained four exons that shared 70 and 73% nucleotide identity with human and equine TSLP, respectively, encoding the signal peptide and full‐length secreted protein. We found significantly increased TSLP expression in lesional and nonlesional skin of dogs with CAD compared with healthy control dogs (P &lt; 0.05), whereas no difference was measured between lesional and nonlesional samples. In cultured primary canine keratinocytes, we found increased TSLP expression after stimulation with house dust mite allergen extract or Toll‐like receptor ligands lipopolysaccharide and poly I:C. Conclusions and clinical importance –  Increased TSLP expression in the skin of dogs with CAD supports an involvement of TSLP in the pathogenesis of CAD similar to that in humans. Further studies should elucidate the function and therapeutic potential of TSLP in CAD. Résumé Contexte –  Chez l’homme, la TSLP (thymic stromal lymphopoietin) joue un rôle central dans le développement de l’inflammation allergique, telle que la dermatite atopique (AD), mais nous ne savons pas si elle est impliquée dans la pathogénie de la dermatite atopique canine (CAD). Hypothèse / objectifs –  Notre objectif est de caractériser la TSLP canine et d’évaluer son expression dans la CAD. Méthodes –  La TSLP canine a été identifiée par homologie de séquence avec la TSLP humaine et de l’ADN complémentaire (ADNc) clonée par RT‐PCR. La RT‐PCR quantitative en temps réel a étéétablie afin d’évaluer l’expression de la TSLP canine dans les kératinocytes canins en culture et dans les biopsies de peaux lésionnelles et non lésionnelles de 12 chiens avec CAD et huit chiens de contrôle sains. Résultats –  L’ADNc partielle de TSLP canine a été cloné et caractérisé. Il contient quatre exons qui partagent respectivement 70 et 73 % d’identité nucléotidique avec la TSLP humaine et équine, codant pour le peptide signal et la protéine sécrétée intégrale. Nous avons trouvé une expression de TSLP significativement accrue dans la peau lésionnelle et non‐lésionnelle des chiens avec CAD par rapport aux chiens témoins sains (P &lt; 0.05), alors qu’aucune différence n’a été mesurée entre les échantillons lésionnels et non‐lésionnels. Dans les kératinocytes canins primaires en culture, nous avons trouvé une expression de TSLP accrue après stimulation avec les extraits d’allergènes d’acariens de poussière de maison ou les lipopolysaccharides ligands du Toll‐like recepteur et poly I:C. Conclusions et importance clinique –  L’expression augmentée de TSLP dans la peau des chiens avec CAD supporte la participation de la TSLP dans la pathogénie de la CAD, semblable à celle de l’homme. De plus amples études devraient élucider la fonction et le potentiel thérapeutique de la TSLP dans la dermatite atopique canine. Resumen Introducción –  en seres humanos, la linfopoietina tímica del estroma (TSLP) juega un papel central en el desarrollo de la inflamación alérgica, como en dermatitis atópica (AD), pero se desconoce si juega un papel en la patogenia de la AD canina (CAD). Objetivos del / de la hipótesis –  nuestro propósito fue caracterizar la TSLP canina y determinar su expresión en casos de CAD. Métodos –  se identificó la TSLP canina basado en la homología de la secuencia con la TSLP humana y el DNA complementario (cDNA) fue clonado mediante RT‐PCR. Se preparó RT‐PCR cuantitativa en tiempo real para determinar la expresión de la TSLP canina en queratinocitos caninos cultivados y en biopsias de piel con lesiones y sin lesiones de 12 perros con CAD y de ocho perros sanos como control. Resultados –  se clonó y caracterizó parcialmente el cDNA de la TSLP. Tenia cuatro exones que compartieron un 70 y un 73% de homologia en nucleótidos con la TSLP humana y equina, respectivamente, codificando el péptido de señal y la proteína secretada completa. Encontramos una expresión mayor de TSLP en la piel con y sin lesiones de perros con CAD comparado con los perros sanos control (P &lt; 0,05), mientras que no se observó ninguna diferencia entre las muestras con y sin lesiones. En queratinocitos caninos primarios cultivados, encontramos una expresión creciente de la TSLP después del estímulo con el extracto alergénico del ácaro del polvo de la casa o con los ligandos de los receptores equivalentes a Toll lipopolisacarido y poli I:C. Conclusiones e importancia clínica –  la expresión creciente de TSLP en la piel de perros con CAD sugiere un papel de la TSLP en la patogenia de la CAD, similar a lo que sucede en seres humanos. Otros estudios deben aclarar la función y el potencial terapéutico de la TSLP en casos de CAD. Zusammenfassung Hintergrund –  Beim Menschen spielt das thymische stromale Lymphopoietin (TSLP) eine zentrale Rolle bei der Entwicklung allergischer Entzündung, wie zum Beispiel bei atopischer Dermatitis (AD), aber es ist nicht bekannt, ob es auch bei der Pathogenese der caninen AD (CAD) eine Rolle spielt. Hypothese /Ziele –  Unser Ziel war eine Beschreibung des caninen TSLP vorzunehmen und seine Exprimierung bei der CAD festzustellen. Methoden –  Canines TSLP wurde mittels Sequenzhomologie mit humanem TSLP identifiziert und die komplementäre DNA (cDNA) mittels RT‐PCR geklont. Ein Real‐time quantitativer RT‐PCR wurde entwickelt, um die Exprimierung des caninen TSLP in kultivierten caninen Keratinozyten und in Proben aus Hautbiopsien läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von 12 Hunden mit CAD und acht gesunden Kontrollhunden zu erfassen. Ergebnisse –  Eine partielle TSLP cDNA wurde geklont und charakterisiert. Dieser Teil beinhaltete vier Exons, welche mit dem humanen TSLP zu 70% und mit dem equinen TSLP zu 73% ident waren und das Signalpeptid und das sezernierte Protein in voller Länge kodierten. Wir stellten eine signifikant erhöhte TSLP Exprimierung in läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von Hunden mit CAD fest im Vergleich zu gesunden Kontrollhunden (P &lt; 0,05), während wir zwischen Proben aus Läsionen und normaler Haut keine Unterschiede feststellen konnten. In kultivierten primären caninen Keratinozyten fanden wir eine erhöhte TSLP Exprimierung nach einer Stimulation mit Hausstaubmilbenextrakt oder Lipopolysacchariden der Toll‐like Rezeptorliganden und Poly I:C. Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung –  Eine erhöhte TSLP Exprimierung in der Haut von Hunden mit CAD unterstützt die Hypothese der Beteiligung von TSLP bei der Pathogenese von CAD, ähnlich wie beim Menschen. 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Hypothesis/Objectives –  Our aim was to characterize canine TSLP and to assess its expression in CAD. Methods –  Canine TSLP was identified based on sequence homology with human TSLP and the complementary DNA (cDNA) cloned by RT‐PCR. Real‐time quantitative RT‐PCR was established to assess the expression of canine TSLP in cultured canine keratinocytes and in skin biopsy specimens from lesional and nonlesional skin of 12 dogs with CAD and eight healthy control dogs. Results –  Partial canine TSLP cDNA was cloned and characterized. It contained four exons that shared 70 and 73% nucleotide identity with human and equine TSLP, respectively, encoding the signal peptide and full‐length secreted protein. We found significantly increased TSLP expression in lesional and nonlesional skin of dogs with CAD compared with healthy control dogs (P &lt; 0.05), whereas no difference was measured between lesional and nonlesional samples. In cultured primary canine keratinocytes, we found increased TSLP expression after stimulation with house dust mite allergen extract or Toll‐like receptor ligands lipopolysaccharide and poly I:C. Conclusions and clinical importance –  Increased TSLP expression in the skin of dogs with CAD supports an involvement of TSLP in the pathogenesis of CAD similar to that in humans. Further studies should elucidate the function and therapeutic potential of TSLP in CAD. Résumé Contexte –  Chez l’homme, la TSLP (thymic stromal lymphopoietin) joue un rôle central dans le développement de l’inflammation allergique, telle que la dermatite atopique (AD), mais nous ne savons pas si elle est impliquée dans la pathogénie de la dermatite atopique canine (CAD). Hypothèse / objectifs –  Notre objectif est de caractériser la TSLP canine et d’évaluer son expression dans la CAD. Méthodes –  La TSLP canine a été identifiée par homologie de séquence avec la TSLP humaine et de l’ADN complémentaire (ADNc) clonée par RT‐PCR. La RT‐PCR quantitative en temps réel a étéétablie afin d’évaluer l’expression de la TSLP canine dans les kératinocytes canins en culture et dans les biopsies de peaux lésionnelles et non lésionnelles de 12 chiens avec CAD et huit chiens de contrôle sains. Résultats –  L’ADNc partielle de TSLP canine a été cloné et caractérisé. Il contient quatre exons qui partagent respectivement 70 et 73 % d’identité nucléotidique avec la TSLP humaine et équine, codant pour le peptide signal et la protéine sécrétée intégrale. Nous avons trouvé une expression de TSLP significativement accrue dans la peau lésionnelle et non‐lésionnelle des chiens avec CAD par rapport aux chiens témoins sains (P &lt; 0.05), alors qu’aucune différence n’a été mesurée entre les échantillons lésionnels et non‐lésionnels. Dans les kératinocytes canins primaires en culture, nous avons trouvé une expression de TSLP accrue après stimulation avec les extraits d’allergènes d’acariens de poussière de maison ou les lipopolysaccharides ligands du Toll‐like recepteur et poly I:C. Conclusions et importance clinique –  L’expression augmentée de TSLP dans la peau des chiens avec CAD supporte la participation de la TSLP dans la pathogénie de la CAD, semblable à celle de l’homme. De plus amples études devraient élucider la fonction et le potentiel thérapeutique de la TSLP dans la dermatite atopique canine. Resumen Introducción –  en seres humanos, la linfopoietina tímica del estroma (TSLP) juega un papel central en el desarrollo de la inflamación alérgica, como en dermatitis atópica (AD), pero se desconoce si juega un papel en la patogenia de la AD canina (CAD). Objetivos del / de la hipótesis –  nuestro propósito fue caracterizar la TSLP canina y determinar su expresión en casos de CAD. Métodos –  se identificó la TSLP canina basado en la homología de la secuencia con la TSLP humana y el DNA complementario (cDNA) fue clonado mediante RT‐PCR. Se preparó RT‐PCR cuantitativa en tiempo real para determinar la expresión de la TSLP canina en queratinocitos caninos cultivados y en biopsias de piel con lesiones y sin lesiones de 12 perros con CAD y de ocho perros sanos como control. Resultados –  se clonó y caracterizó parcialmente el cDNA de la TSLP. Tenia cuatro exones que compartieron un 70 y un 73% de homologia en nucleótidos con la TSLP humana y equina, respectivamente, codificando el péptido de señal y la proteína secretada completa. Encontramos una expresión mayor de TSLP en la piel con y sin lesiones de perros con CAD comparado con los perros sanos control (P &lt; 0,05), mientras que no se observó ninguna diferencia entre las muestras con y sin lesiones. En queratinocitos caninos primarios cultivados, encontramos una expresión creciente de la TSLP después del estímulo con el extracto alergénico del ácaro del polvo de la casa o con los ligandos de los receptores equivalentes a Toll lipopolisacarido y poli I:C. Conclusiones e importancia clínica –  la expresión creciente de TSLP en la piel de perros con CAD sugiere un papel de la TSLP en la patogenia de la CAD, similar a lo que sucede en seres humanos. Otros estudios deben aclarar la función y el potencial terapéutico de la TSLP en casos de CAD. Zusammenfassung Hintergrund –  Beim Menschen spielt das thymische stromale Lymphopoietin (TSLP) eine zentrale Rolle bei der Entwicklung allergischer Entzündung, wie zum Beispiel bei atopischer Dermatitis (AD), aber es ist nicht bekannt, ob es auch bei der Pathogenese der caninen AD (CAD) eine Rolle spielt. Hypothese /Ziele –  Unser Ziel war eine Beschreibung des caninen TSLP vorzunehmen und seine Exprimierung bei der CAD festzustellen. Methoden –  Canines TSLP wurde mittels Sequenzhomologie mit humanem TSLP identifiziert und die komplementäre DNA (cDNA) mittels RT‐PCR geklont. Ein Real‐time quantitativer RT‐PCR wurde entwickelt, um die Exprimierung des caninen TSLP in kultivierten caninen Keratinozyten und in Proben aus Hautbiopsien läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von 12 Hunden mit CAD und acht gesunden Kontrollhunden zu erfassen. Ergebnisse –  Eine partielle TSLP cDNA wurde geklont und charakterisiert. Dieser Teil beinhaltete vier Exons, welche mit dem humanen TSLP zu 70% und mit dem equinen TSLP zu 73% ident waren und das Signalpeptid und das sezernierte Protein in voller Länge kodierten. Wir stellten eine signifikant erhöhte TSLP Exprimierung in läsionaler und nicht‐läsionaler Haut von Hunden mit CAD fest im Vergleich zu gesunden Kontrollhunden (P &lt; 0,05), während wir zwischen Proben aus Läsionen und normaler Haut keine Unterschiede feststellen konnten. In kultivierten primären caninen Keratinozyten fanden wir eine erhöhte TSLP Exprimierung nach einer Stimulation mit Hausstaubmilbenextrakt oder Lipopolysacchariden der Toll‐like Rezeptorliganden und Poly I:C. Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung –  Eine erhöhte TSLP Exprimierung in der Haut von Hunden mit CAD unterstützt die Hypothese der Beteiligung von TSLP bei der Pathogenese von CAD, ähnlich wie beim Menschen. Weitere Studien sollten das funktionelle und therapeutische Potential von TSLP bei der CAD beleuchten.</abstract><cop>Oxford, UK</cop><pub>Blackwell Publishing Ltd</pub><pmid>23331680</pmid><doi>10.1111/j.1365-3164.2012.01096.x</doi><tpages>8</tpages></addata></record>
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ispartof Veterinary dermatology, 2013-02, Vol.24 (1), p.54-e14
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language eng
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source Access via Wiley Online Library; MEDLINE
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Animals
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Cytokines - genetics
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Dogs
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Real-Time Polymerase Chain Reaction - veterinary
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