동부(Vigna sinensis)의 국부병반을 이용한 Cucumber mosaic virus와 Broad bean wilt virus 2의 구별

Cucumber mosaic virus(CMV) and Broad bean wilt virus 2(BBWV2) were isolated from Gentiana scabra plants showing typical mosaic and yellowing symptoms. When the inoculum of mosaic symptom propagated in Nicotiana benthamiana was inoculated to primary leaves of Vigna sinensis, the local lesions of different types was developed. Type one produced a small necrotic spot(SNS) of pinpoint type, while the other one showed a large necrotic spot(LNS) of halo type. LNS on primary leaves of V. sinensis was also induced by inoculum from yellowing symptom on G scabra. Single lesion from SNS induced a typical mosaic symptom on N. Benthamiana. On the other hand, LNS produced a chlorotic ring symptom on inoculated leaves and mosaic plus necrotic ringspot on upper leaves of N. benthamiana. An isolate of CMV from SNS and BBWV2 from LNS were detected by using dsRNA analysis, RT-PCR and agar gel double-diffusion test. Thus, our results should provide a tool of a simple method for discrimination from mixed infected plants by CMV and BBWV2. 용담에서 전형적인 모자이크 증상을 나타낸 바이러스 이병주 및 황화증상을 보이는 식물체를 채집하였다. 이들 중, 모자이크 증상의 잎을 접종하여 전신감염된 Nicotiana benthamiana로부터의 접종원을 동부의 초생엽에 접종하였을 때, 2가지 형태의 괴사 국부병반이 형성되었다. 즉 하나는 작은 크기 pinpoint 형태의 국부 괴사병반(SNS)이며, 다른 하나는 SNS보다 약간 큰 halo 형의 국부 괴사 병반(LNS)으로 뚜렷하게 구분되었다. 한편 황화 병징의 용담으로부터 증식된 접종원은 동부의 초생엽에 LNS만 형성하였다. 동부에 형성된 SNS 및 LNS형 병반을 각각 단일병반 분리하여 N. bentamiana에 접종하였다. 그 결과 SNS를 접종한 N. bentamiana에서는 접종엽에 무병징, 상위엽에는 전형적인 모자이크 증상이 발현되었다. 반면 LNS를 접종한 식물체에서는 접종엽에 퇴록 윤문이 형성되었으며, 상위엽에는 괴저를 동반한 모자이크 증상이 발현되었다. 이들 SNS 및 LNS 병반으로부터 분리한 바이러스를 dsRNA, RT-PCR 및 혈청학적 유연관계 분석을 통하여 SNS 병반은 CMV에 의해서, LNS는 BBWV2에 의해서 유도된다는 것을 확인하였다. 이 연구의 결과로부터 자연계에서 CMV와 BBWV2가 복합감염되어 병징의 구분이 어려운 경우, 동부에 접종하여 유도된 병반을 이용하여 두 바이러스의 감염을 쉽게 구분할 수 있는 방법으로 활용할 수 있을 것으로 생각되었다.