Dondurulmuş Boğa Spermasının Değişik Kapasitör Maddelerle M Vitro Kapasitasyonu

Çalışmada, heparin (1. grup), heparin+kafein (2. grup) ve kafein+kalsiyum ionoforun (3. grup) in vitro spermatozoon kapasitasyonu üzerine etkileri incelendi. Bu amaçla sperma 1. grupta 10, 25 ve 100 pg/ml heparin ile 5, 15 ve 60 dakikalık süreler için inkiibasyona bırakılırken 2. grupta 5, 10, 15 mM kafein, 0, 5, 10, 25 pig/ml heparin ile ve 3. grupta 0, 5, 10 ıııM kafein, 0.1, 0.2, 0.3 pM kalsiyum iyoııofor ile kombine edilerek kullanıldı. Kapasitasyonun sağlanmasından sonra spermaya 100 pg/ıııl li- zofosfatidilkolin (LPC) ilave edilerek akrozom reaksiyonu (AR) indiiklendi. Oluşan reaksiyonun ve spermatozoonların canlılıklarının belirlenebilmesi için trypan blue ve Giemsa ile ikili boyama yapıldı. Bu boyama ile spermatozoonların canlılıkları ve reaksiyona girmeleri gruplandırılarak değerlendirildi. Gruplar: 1- Canlı, reaksiyon (-); 2- Ölü, reaksiyon (-); 3- Canlı, reaksiyon (+); 4- Ölü, reaksiyon (+) olarak adlandırıldılar. Buna göre, her iiç grupta elde edilen en yüksek kapasitasyonu uğramış spermatozoon oranları 1. grupta (100 pg/ml heparinle 60 dakika inkiibasyon) %25.466, 2. grupta (15 mM kafein+25 gg/ml heparin) %28.440 ve 3. grupta (10 mM kafein+0.3 |iM kalsiyum ionofor) %29.908 olarak bulundu. İlk grupta kullanılan heparin konsantrasyonunun ve artan in- kiibasyon süresinin kapasite olmuş spermatozoon oranlanın arttırdığı gözlendi. İkinci ve üçüncü gruplarda ise kullanılan kapasitör maddelerin birbirlerinin etkilerini destekledikleri ve toplam konsantrasyonlarının artmasına bağlı olarak kapasite olmuş spermatozoon oranlarının yükseldiği belirlendi.