A METHOD OF TRANSFORMATION

Vacuum infiltration is an effective way of infecting Eucalyptus explants with Agrobacterium. It results in a high frequency of expression as shown by GUS histochemical assays. The procedure is highly time efficient and less damaging to the plant tissue, as wounding of cotyledon and leaf explants was...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: MOURADOVA, EKATERINA, HE, DING, G, O'DWYER, CECILIA, YANG, YUMIN, TEASDALE, ROBERT, DIXON
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:Vacuum infiltration is an effective way of infecting Eucalyptus explants with Agrobacterium. It results in a high frequency of expression as shown by GUS histochemical assays. The procedure is highly time efficient and less damaging to the plant tissue, as wounding of cotyledon and leaf explants was not needed. Stably transformed plants could be regenerated from vacuum infiltrated explants. GUS histochemical assay and Southern hybridisation analyses confirmed the transformation. It has also been determined that the application of vacuum may be supplemented to the post application of pressure to create a transformationally effective pressure gradient. L'infiltration sous vide est une manière efficace d'infecter des explants d'Eucalyptus avec Agrobacterium. Il en résulte une haute fréquence d'expression tel que le montrent les analyses histochimiques GUS. Ledit procédé fait gagner beaucoup de temps et endommage moins les tissus végétaux du fait qu'il n'est pas nécessaire d'effectuer une lésion sur les explants sous forme de cotylédon ou de feuille. Des plantes à transformation stable ont pu être régénérées à partir d'explants infiltrés sous vide. L'analyse histochimique GUS et les analyses d'hybridation Southern ont confirmé cette transformation. Il a également été déterminé que l'application de vide peut être ajoutée à l'application ultérieure de pression pour créer un gradient efficace de pression de transformation.