RECOMBINANT CLONE SELECTION SYSTEM

Cloning systems useful for the isolation of recombinant nucleic acid are disclosed in which the recombination of cloning-system nucleic acid and foreign nucleic acid is linked to the expression of a moiety on the surface of a host organism, the moiety being a first member of a binding pair. When recombination occurs between the nucleic acid and the foreign nucleic acid, the moiety is expressed on the surface of the host organism. The isolation of recombinant nucleic acid is then performed by attaching a second member of the binding pair to a solid support and contacting the host organism with the support. When the first member of the binding pair is expressed on the surface of the host organism, the host organism binds to the second member of the binding pair attached to the solid support, thereby selectively isolating those organisms. Other aspects of the invention include devices for the isolation of individual cells that differentially express binding moieties on their surface. The devices may be adapted for polynucleotide sequencing and analysis of polynucleoides in the isolated cells. Additional aspects of the invention include methods of using the devices for single cell isolation and analysis. La présente invention concerne des systèmes de clonage convenant particulièrement à l'isolement d'acide nucléique de recombinaison, systèmes selon lesquels la recombinaison de l'acide nucléique du système de clonage et de l'acide nucléique étranger est liée à l'expression sur la surface d'un organisme hôte d'un groupe constituant le premier élément d'une paire de liaison. Lors de la recombinaison entre l'acide nucléique et l'acide nucléique étranger, le groupe s'exprime sur la surface de l'organisme hôte. L'isolement de l'acide nucléique de recombinaison s'obtient par attachement d'un second élément de la paire de liaison sur un support solide et par mise en contact de l'organisme hôte avec le support. Lorsque sur la surface de l'organisme hôte le premier élément de la paire de liaison s'est exprimé, l'organisme hôte se lie au second élément de la paire de liaison attachée au support solide, isolant sélectivement ces organismes par la même occasion. D'autres aspects de l'invention concernent des dispositifs d'isolement de cellules considérées individuellement et exprimant sur leur surface les groupes de liaison de façon différentiée. Ce dispositif est adaptable pour le séquencement de polynucléotides et l'analyse des polynucléotides contenus dans les cellules