ANTI-ENZYME ANTIBODY IMMUNOASSAY

An immunoassay utilizing the inhibition or inactivation of a signal generating molecule to reduce a controlled baseline signal to a lower level of signal corresponding to the amount of analyte present in the sample. One embodiment is a heterogeneous enzyme immunoassay, preferably using monoclonal antibodies wherein an insolubilized first antibody binds to an antigen analyte of interest. A second and third antibody, which themselves have been conjugated together, are added so that the second antibody complexes preferentially with the antigen. Then an active enzyme and its specific substrate are added to the complex, simultaneously for example, and enzyme will be bound preferentially to the third antibody which exerts an inhibitory influence on the enzyme. The resultant decrease in enzyme activity is measured and the relative amount of antigen present in the sample is calculated. L'immuno-analyse décrite utilise l'inhibition ou l'inactivation d'une molécule génératrice de signaux pour réduire un signal de base régulé à un niveau inférieur correspondant à la quantité d'analyte présent dans l'échantillon. L'un des modes de réalisation de la présente invention concerne une immuno-analyse d'enzymes hétérogènes, utilisant de préférence des anticorps monoclonaux, dans lesquels un premier anticorps rendu insoluble se lie à un analyte d'antigène en question. Un second anticorps et un troisième anticorps, eux-mêmes conjugués l'un avec l'autre sont ajoutés de telle sorte que le second anticorps forme un complexe de préférence avec l'antigène. On ajoute ensuite une enzyme active et son substrat spécifique aux complexes, par exemple simultanément, l'enzyme se liant ensuite de préférence au troisième anticorps, qui exerce une influence inhibitoire sur l'enzyme. On mesure alors la baisse de l'activité de l'enzyme qui en résulte et on calcule la quantité relative d'antigène présente dans l'échantillon.