ASSAY FOR PHAGE SUSCEPTIBILITY OF BACTERIA

Methods for determining host range and potency of a phage or a test sample (comprising one or more phage, optionally in combination with an antibacterial agent) are described. In some embodiments, the methods comprise the steps of providing a multiwell plate for the generation of one or more host-ph...

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Hauptverfasser: FACKLER, Joseph, COHEN, Rob, CHAUDHRY, Waqas
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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creator FACKLER, Joseph
COHEN, Rob
CHAUDHRY, Waqas
description Methods for determining host range and potency of a phage or a test sample (comprising one or more phage, optionally in combination with an antibacterial agent) are described. In some embodiments, the methods comprise the steps of providing a multiwell plate for the generation of one or more host-phage response result, wherein the wells of said plate are arranged in rows, and wherein one or more of said rows may be used in conducting the method, and wherein each row of said one or more rows used in conducting the method comprises: at least a first test well comprising suitable liquid growth media, a test phage and a test bacteria strain to provide a host-phage response result; a growth media control well comprising said growth media (i.e., no test phage or test bacteria present); a bacterial cell growth control well comprising said growth media and the test bacteria strain (i.e., no test phage present); at least one well comprising a diluted source preparation of the test bacteria strain in said growth media; and optionally, a positive control well comprising said growth media, the test phage and the test bacteria strain; incubating said plate for a sufficient duration and under conditions suitable for growth of the test bacteria strain(s) in said growth media; and measuring a characteristic indicative of growth of the test bacteria strain(s) in the wells. The methods can be used to, for example, assist in the selection of phage (or at least candidate phage), or a combination of phage, optionally in combination with an antibacterial agent, for successful therapeutic use ("phage therapy"). L'invention concerne des procédés pour déterminer le spectre d'hôte et la puissance d'un phage ou d'un échantillon pour essai (comprenant un ou plusieurs phages, éventuellement en combinaison avec un agent antibactérien). Dans certains modes de réalisation, les procédés comprennent les étapes consistant à prendre une plaque multipuits pour la génération d'un ou de plusieurs résultats de réponse hôte-phage, les puits de ladite plaque étant agencés en rangées, une ou plusieurs desdites rangées pouvant être utilisées pour la mise en œuvre du procédé, et ladite rangée ou chacune desdites rangées utilisées pour la mise en œuvre du procédé comprenant : au moins un premier puits d'essai comprenant des milieux de croissance liquides appropriés, un phage d'essai et une souche de bactéries d'essai pour fournir un résultat de réponse hôte-phage ; un puits témoin de milieux de croiss
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In some embodiments, the methods comprise the steps of providing a multiwell plate for the generation of one or more host-phage response result, wherein the wells of said plate are arranged in rows, and wherein one or more of said rows may be used in conducting the method, and wherein each row of said one or more rows used in conducting the method comprises: at least a first test well comprising suitable liquid growth media, a test phage and a test bacteria strain to provide a host-phage response result; a growth media control well comprising said growth media (i.e., no test phage or test bacteria present); a bacterial cell growth control well comprising said growth media and the test bacteria strain (i.e., no test phage present); at least one well comprising a diluted source preparation of the test bacteria strain in said growth media; and optionally, a positive control well comprising said growth media, the test phage and the test bacteria strain; incubating said plate for a sufficient duration and under conditions suitable for growth of the test bacteria strain(s) in said growth media; and measuring a characteristic indicative of growth of the test bacteria strain(s) in the wells. The methods can be used to, for example, assist in the selection of phage (or at least candidate phage), or a combination of phage, optionally in combination with an antibacterial agent, for successful therapeutic use ("phage therapy"). L'invention concerne des procédés pour déterminer le spectre d'hôte et la puissance d'un phage ou d'un échantillon pour essai (comprenant un ou plusieurs phages, éventuellement en combinaison avec un agent antibactérien). Dans certains modes de réalisation, les procédés comprennent les étapes consistant à prendre une plaque multipuits pour la génération d'un ou de plusieurs résultats de réponse hôte-phage, les puits de ladite plaque étant agencés en rangées, une ou plusieurs desdites rangées pouvant être utilisées pour la mise en œuvre du procédé, et ladite rangée ou chacune desdites rangées utilisées pour la mise en œuvre du procédé comprenant : au moins un premier puits d'essai comprenant des milieux de croissance liquides appropriés, un phage d'essai et une souche de bactéries d'essai pour fournir un résultat de réponse hôte-phage ; un puits témoin de milieux de croissance comprenant lesdits milieux de croissance (c'est-à-dire sans présence de phage d'essai ou de bactérie d'essai) ; un puits témoin de croissance de cellules bactériennes comprenant lesdits milieux de croissance et la souche de bactéries d'essai (c'est-à-dire sans présence de phage d'essai) ; au moins un puits comprenant une préparation source diluée de la souche de bactéries d'essai dans lesdits milieux de croissance ; et, éventuellement, un puits témoin positif comprenant lesdits milieux de croissance, le phage d'essai et la souche de bactéries d'essai ; incuber ladite plaque pendant une durée suffisante et dans des conditions appropriées pour la croissance de la ou des souches de bactéries d'essai dans lesdits milieux de croissance ; et mesurer une caractéristique révélatrice de la croissance de la ou des souches de bactéries d'essai dans les puits. Les procédés peuvent être utilisés, par exemple, pour faciliter la sélection d'un phage (ou d'au moins un phage candidat), ou d'une combinaison de phage, éventuellement en combinaison avec un agent antibactérien, en vue d'un usage thérapeutique réussi ("phagothérapie").</description><language>eng ; fre</language><subject>BEER ; BIOCHEMISTRY ; CHEMISTRY ; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR ; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES ; ENZYMOLOGY ; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS ; METALLURGY ; MICROBIOLOGY ; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING ; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS ; SPIRITS ; VINEGAR ; WINE</subject><creationdate>2023</creationdate><oa>free_for_read</oa><woscitedreferencessubscribed>false</woscitedreferencessubscribed></display><links><openurl>$$Topenurl_article</openurl><openurlfulltext>$$Topenurlfull_article</openurlfulltext><thumbnail>$$Tsyndetics_thumb_exl</thumbnail><linktohtml>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&amp;date=20230622&amp;DB=EPODOC&amp;CC=WO&amp;NR=2023114706A1$$EHTML$$P50$$Gepo$$Hfree_for_read</linktohtml><link.rule.ids>230,308,776,881,25542,76289</link.rule.ids><linktorsrc>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&amp;date=20230622&amp;DB=EPODOC&amp;CC=WO&amp;NR=2023114706A1$$EView_record_in_European_Patent_Office$$FView_record_in_$$GEuropean_Patent_Office$$Hfree_for_read</linktorsrc></links><search><creatorcontrib>FACKLER, Joseph</creatorcontrib><creatorcontrib>COHEN, Rob</creatorcontrib><creatorcontrib>CHAUDHRY, Waqas</creatorcontrib><title>ASSAY FOR PHAGE SUSCEPTIBILITY OF BACTERIA</title><description>Methods for determining host range and potency of a phage or a test sample (comprising one or more phage, optionally in combination with an antibacterial agent) are described. 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The methods can be used to, for example, assist in the selection of phage (or at least candidate phage), or a combination of phage, optionally in combination with an antibacterial agent, for successful therapeutic use ("phage therapy"). L'invention concerne des procédés pour déterminer le spectre d'hôte et la puissance d'un phage ou d'un échantillon pour essai (comprenant un ou plusieurs phages, éventuellement en combinaison avec un agent antibactérien). 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The methods can be used to, for example, assist in the selection of phage (or at least candidate phage), or a combination of phage, optionally in combination with an antibacterial agent, for successful therapeutic use ("phage therapy"). L'invention concerne des procédés pour déterminer le spectre d'hôte et la puissance d'un phage ou d'un échantillon pour essai (comprenant un ou plusieurs phages, éventuellement en combinaison avec un agent antibactérien). Dans certains modes de réalisation, les procédés comprennent les étapes consistant à prendre une plaque multipuits pour la génération d'un ou de plusieurs résultats de réponse hôte-phage, les puits de ladite plaque étant agencés en rangées, une ou plusieurs desdites rangées pouvant être utilisées pour la mise en œuvre du procédé, et ladite rangée ou chacune desdites rangées utilisées pour la mise en œuvre du procédé comprenant : au moins un premier puits d'essai comprenant des milieux de croissance liquides appropriés, un phage d'essai et une souche de bactéries d'essai pour fournir un résultat de réponse hôte-phage ; un puits témoin de milieux de croissance comprenant lesdits milieux de croissance (c'est-à-dire sans présence de phage d'essai ou de bactérie d'essai) ; un puits témoin de croissance de cellules bactériennes comprenant lesdits milieux de croissance et la souche de bactéries d'essai (c'est-à-dire sans présence de phage d'essai) ; au moins un puits comprenant une préparation source diluée de la souche de bactéries d'essai dans lesdits milieux de croissance ; et, éventuellement, un puits témoin positif comprenant lesdits milieux de croissance, le phage d'essai et la souche de bactéries d'essai ; incuber ladite plaque pendant une durée suffisante et dans des conditions appropriées pour la croissance de la ou des souches de bactéries d'essai dans lesdits milieux de croissance ; et mesurer une caractéristique révélatrice de la croissance de la ou des souches de bactéries d'essai dans les puits. 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