METHODS FOR THE PURIFICATION OF REFOLDED FC-PEPTIDE FUSION PROTEIN

The present invention relates to new methods for the purification of Fc-peptide fusion protein (peptibodies) derived from inclusion bodies after prokaryotic expression. In particular, it relates to chromatographic methods of the fusion peptides after refolding and dimerization comprising affinity capture, intermediate and polishing chromatographies. These methods facilitate the decrease of product-related impurities, such as sulfide variants or charge variants of the Fc-peptide fusion proteins in the final product. In addition, the present invention relates to specific conditions and selected buffers avoiding aggregation, precipitation, and degradation of the Fc-peptide fusion proteins. Finally, the methods of the present invention result in a formulated pharmaceutical composition or a pre-stage pharmaceutical composition containing an Fc-peptide fusion protein of high purity. La présente invention concerne de nouveaux procédés pour la purification de protéine fusionnée avec un Fc-peptide (pepticorps) dérivée de corps d'inclusion après expression procaryote. En particulier, l'invention concerne des procédés chromatographiques des peptides de fusion après repliement et dimérisation comprenant des chromatographies par capture d'affinité, intermédiaires et de polissage. Ces procédés facilitent la diminution d'impuretés liées au produit, telles que des variants de sulfure ou des variants de charge des protéines fusionnées avec un Fc-peptide dans le produit final. De plus, la présente invention concerne des conditions spécifiques et des tampons sélectionnés évitant l'agrégation, la précipitation et la dégradation des protéines fusionnées avec un Fc-peptide. Enfin, les procédés selon la présente invention conduisent à une composition pharmaceutique formulée ou à une composition pharmaceutique de pré-étape contenant une protéine fusionnée avec un Fc-peptide de haute pureté.