STEVIOL GLYCOSIDE PRODUCTION

The present invention relates to a method for increasing the degree of glycosylation of a composition comprising steviol glycosides, which method comprises: a. contacting said composition comprising steviol glycosides with a recombinant microorganism, a cell free extract derived from such a microorg...

Ausführliche Beschreibung

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Hauptverfasser: MADERN, MARCELLA KATHARINA, WINTER, REMKO TSJIBBE, BERG, VAN DEN, MARCO ALEXANDER
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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creator MADERN, MARCELLA KATHARINA
WINTER, REMKO TSJIBBE
BERG, VAN DEN, MARCO ALEXANDER
description The present invention relates to a method for increasing the degree of glycosylation of a composition comprising steviol glycosides, which method comprises: a. contacting said composition comprising steviol glycosides with a recombinant microorganism, a cell free extract derived from such a microorganism or an enzyme preparation derived from either thereof; and b. thereby to increase the degree of glycosylation of the composition comprising steviol glycosides, wherein the recombinant microorganism comprises one or more nucleotide sequence(s) encoding: a polypeptide having ent-copalyl pyrophosphate synthase activity;a polypeptide having ent-Kaurene synthase activity; a polypeptide having ent-Kaurene oxidase activity; a polypeptide having kaurenoic acid 13-hydroxylase activity; and one or more polypeptides having UDP-glucosyltransferase activity whereby expression of the nucleotide sequence(s) confer(s) on the microorganism the ability to produce at least one steviol glycoside. The present invention also relates to a composition comprising steviol glycosides obtainable by such a method. La présente invention concerne un procédé pour augmenter le degré de glycosylation d'une composition comprenant des glycosides de stéviol, le procédé consistant à : a. mettre en contact ladite composition comprenant des glycosides de stéviol avec un micro-organisme recombinant, un extrait exempt de cellules dérivé d'un tel micro-organisme ou une préparation enzymatique dérivée de l'un ou de l'autre ; et b. de manière à augmenter le degré de glycosylation de la composition comprenant des glycosides de stéviol, le micro-organisme recombinant comprenant une ou plusieurs séquence(s) nucléotidique(s) codant : pour un polypeptide présentant une activité d'ent-copalyl pyrophosphate synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène oxydase ; pour un polypeptide présentant une activité d'acide kaurénoïque 13-hydroxylase ; et pour un ou plusieurs polypeptides présentant une activité d'UDP-glucosyltransférase, l'expression de la/des séquence(s) nucléotidique(s) conférant, au micro-organisme, l'aptitude à produire au moins un glycoside de stéviol. La présente invention concerne également une composition comprenant des glycosides de stéviol pouvant être obtenue par un tel procédé.
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The present invention also relates to a composition comprising steviol glycosides obtainable by such a method. La présente invention concerne un procédé pour augmenter le degré de glycosylation d'une composition comprenant des glycosides de stéviol, le procédé consistant à : a. mettre en contact ladite composition comprenant des glycosides de stéviol avec un micro-organisme recombinant, un extrait exempt de cellules dérivé d'un tel micro-organisme ou une préparation enzymatique dérivée de l'un ou de l'autre ; et b. de manière à augmenter le degré de glycosylation de la composition comprenant des glycosides de stéviol, le micro-organisme recombinant comprenant une ou plusieurs séquence(s) nucléotidique(s) codant : pour un polypeptide présentant une activité d'ent-copalyl pyrophosphate synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène oxydase ; pour un polypeptide présentant une activité d'acide kaurénoïque 13-hydroxylase ; et pour un ou plusieurs polypeptides présentant une activité d'UDP-glucosyltransférase, l'expression de la/des séquence(s) nucléotidique(s) conférant, au micro-organisme, l'aptitude à produire au moins un glycoside de stéviol. 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The present invention also relates to a composition comprising steviol glycosides obtainable by such a method. La présente invention concerne un procédé pour augmenter le degré de glycosylation d'une composition comprenant des glycosides de stéviol, le procédé consistant à : a. mettre en contact ladite composition comprenant des glycosides de stéviol avec un micro-organisme recombinant, un extrait exempt de cellules dérivé d'un tel micro-organisme ou une préparation enzymatique dérivée de l'un ou de l'autre ; et b. de manière à augmenter le degré de glycosylation de la composition comprenant des glycosides de stéviol, le micro-organisme recombinant comprenant une ou plusieurs séquence(s) nucléotidique(s) codant : pour un polypeptide présentant une activité d'ent-copalyl pyrophosphate synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène oxydase ; pour un polypeptide présentant une activité d'acide kaurénoïque 13-hydroxylase ; et pour un ou plusieurs polypeptides présentant une activité d'UDP-glucosyltransférase, l'expression de la/des séquence(s) nucléotidique(s) conférant, au micro-organisme, l'aptitude à produire au moins un glycoside de stéviol. 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The present invention also relates to a composition comprising steviol glycosides obtainable by such a method. La présente invention concerne un procédé pour augmenter le degré de glycosylation d'une composition comprenant des glycosides de stéviol, le procédé consistant à : a. mettre en contact ladite composition comprenant des glycosides de stéviol avec un micro-organisme recombinant, un extrait exempt de cellules dérivé d'un tel micro-organisme ou une préparation enzymatique dérivée de l'un ou de l'autre ; et b. de manière à augmenter le degré de glycosylation de la composition comprenant des glycosides de stéviol, le micro-organisme recombinant comprenant une ou plusieurs séquence(s) nucléotidique(s) codant : pour un polypeptide présentant une activité d'ent-copalyl pyrophosphate synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène synthase ; pour un polypeptide présentant une activité d'ent-kaurène oxydase ; pour un polypeptide présentant une activité d'acide kaurénoïque 13-hydroxylase ; et pour un ou plusieurs polypeptides présentant une activité d'UDP-glucosyltransférase, l'expression de la/des séquence(s) nucléotidique(s) conférant, au micro-organisme, l'aptitude à produire au moins un glycoside de stéviol. 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