VNAR RECOMBINANT MONOCLONAL ANTIBODIES THAT NEUTRALIZE VASCULAR ENDOPHELIAL GROWTH FACTOR VEGF

The present invention relates to the selection, isolation and purification of proteins that are variable regions, known as VHNAR or vNAR, specific to IgNAR-type immunoglobulin antigen receptors and which originate from Elasmobranchii, the clones from which they derive being called VEGFvNAR V32R and V19, and the respective antibodies being called V32R and V19. The amino acid sequences thereof were elucidated, as were the tertiary structures thereof, and the capacity thereof to neutralize vascular endothelial growth factor (VEGF) activity was determined. During development of the invention, these proteins were optimized for expression in an E.coli production model at industrial level. The invention involves the use of these antibodies in general for treating disorders associated with angiogenesis or neovascularization and, in particular, for treating ophthalmological disorders associated with neovascularization by means of the topical administration thereof. La presente invención se refiere a la selección, aislamiento y purificación de proteínas que pertenecen a regiones variables denominadas VHNAR ó vNAR propias de las inmunoglobulinas tipo IgNARs receptoras de antígenos y que provienen de elasmobranquios; las clonas de las cuales derivan se les denomina VEGFvNAR V32R y V19, y a los anticuerpos respectivos se les denomina V32R y V19. Sus secuencias aminoacídicas fueron elucidadas,así como sus estructuras terciarias,y se determinó su capacidad para neutralizar la actividad del factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF).Durante el desarrollo de la invención estas proteínas fueron optimizadas para expresarse en un modelo de producción de E.coli a nivel industrial. La invención implica el uso de estos anticuerpos en general para tratar padecimientos relacionados con la angiogénesis o neovascularización y de manera particular para tratar padecimientos oftalmológicos relacionados la neovascularización mediante su administración tópica. La présente invention se rapporte à la sélection, à l'isolement et à la purification de protéines qui appartiennent à des régions variables appelées VHNAR ou vNAR propres aux immunoglobulines de type IgNARs récepteurs d'antigènes et qui proviennent de sélaciens; les clones desquels ils proviennent étant appelés VEGFvNAR V32R et V19, et les anticorps respectifs étant appelés V32R et V19. Leurs séquences d'acides aminés ont été établies ainsi que leurs structures tertiaires et on a déterminé leur capacité pour neutraliser l'act