CONJUGATE HAVING CLEAVABLE LINKING AGENT

A method and reagent that can be used to eliminate the signal caused by non-specific binding of a labeled conjugate, e.g., a specific binding member attached to a label, to a solid phase, e.g., a magnetic microparticle. The method and the reagent involve the use of a cleavable linking agent to link...

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Hauptverfasser: KONRATH, JOHN G, MOORE, JEFFREY A, HIMMELSBACH, RICHARD J
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:A method and reagent that can be used to eliminate the signal caused by non-specific binding of a labeled conjugate, e.g., a specific binding member attached to a label, to a solid phase, e.g., a magnetic microparticle. The method and the reagent involve the use of a cleavable linking agent to link the label to the specific binding member that specifically binds to the analyte. The use of a cleavable linking agent would allow the release of the label from the specific binding member from the complex comprising the magnetic microparticle, analyte, and labeled conjugate into solution. After the release of the label, the magnetic microparticles having any label non-specifically bound thereto, are removed from the reaction mixture. Only the label, e.g., acridinium, from the labeled conjugate would remain in the elution well. The conjugate that is non-specifically bound through interaction between the label and the solid phase, e.g., a magnetic particle, would remain bound to the solid phase, and would subsequently be removed from the elution well when the solid phase is removed from the elution well and transferred to another well the introduction of additional reagent(s). L'invention porte sur un procédé et un réactif qui peuvent être utilisés pour éliminer le signal provoqué par une liaison non spécifique à un conjugué marqué, par exemple, un élément de liaison spécifique attaché à un marqueur, à une phase solide, par exemple, une microparticule magnétique. Le procédé et le réactif mettent en jeu l'utilisation d'un agent de liaison clivable pour lier le marqueur à l'élément de liaison spécifique qui se lie spécifiquement à l'analyte. L'utilisation d'un agent de liaison clivable permettrait la libération du marqueur de l'élément de liaison spécifique à partir du complexe comprenant la microparticule magnétique, l'analyte et le conjugué marqué en solution. Après la libération du marqueur, les microparticules magnétiques n'ayant aucun marqueur lié non spécifiquement à celles-ci, sont retirées du mélange réactionnel. Seul le marqueur, par exemple l'acridinium, provenant du conjugué marqué, resterait dans le puits d'élution. Le conjugué qui est lié de façon non spécifique par interaction entre le marqueur et la phase solide, par exemple une particule magnétique, resterait lié à la phase solide, et serait ultérieurement retiré du puits d'élution lorsque la phase solide est retirée du puits d'élution et transférée vers un autre puits avec introduction d'un ou plusi