SMALL MOLECULE FLUORESCENT SENSORS FOR DETECTION OF POST-TRANSLATIONAL MODIFICATIONS AND PROTEIN-PROTEIN INTERACTIONS IN BIOASSAYS

The present invention relates to novel compounds which are capable as acting as fluorescent sensors or which are precursors for these and for the use of these for the assay of biological processes such as posttranslational modifications of biological molecules such as phosphorylation, de-phosphorylation, proteolytic cleavage, phosphodiesterase mediated hydrolysis of cyclic nucleotides, methylation, acetylation of proteins peptides, DNA, lipids and the detection of biomolecule interactions (e.g., protein-protein interactions). A small molecule sensor is described which can associate to phosphorylated biological targets via metal ion - phosphate association. The association event can be monitored as fluorescence quench, sensitized emission, fluorescence polarization or a combination thereof. The sensor is useful for determining enzyme activities in a homogeneous assay format and/or in a multiplex format. La présente invention porte sur de nouveaux composés qui sont susceptibles de servir de détecteurs fluorescents ou qui sont des précurseurs de ceux-ci, et sur l'utilisation de ceux-ci pour le dosage de processus biologiques tels que des modifications post-traductionnelles de molécules biologiques telles que la phosphorylation, la déphosphorylation, le clivage protéolytique, l'hydrolyse médiée par phosphodiestérase de nucléotides cycliques, la méthylation, l'acétylation de protéines, peptides, ADN, lipides, et la détection d'interactions de biomolécules (par exemple, les interactions protéine-protéine). L'invention porte sur un détecteur à petites molécules qui peut s'associer à des cibles biologiques phosphorylées par le biais d'une association ion métallique-phosphate. L'événement d'association peut être surveillé sous la forme d'une désactivation de fluorescence, d'une émission sensibilisée, d'une polarisation de fluorescence ou d'une combinaison de celles-ci. Le détecteur est utile pour déterminer des activités enzymatiques dans un format de dosage homogène et/ou dans un format multiplex.