METHODS, SYSTEMS, AND KITS FOR ANALYSIS OF POLYNUCLEOTIDES

Methods, systems, compositions and kits for improved detection of polynucleotides. In one aspect, there is provided a method for separating polynucleotides (such as DNA or RNA) using a liquid chromatographic separation device (such as a reverse phase column or an ion exchange column), contacting elu...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser:	LEGENDRE, BENJAMIN, JR, RUDOLPH, JOSEPH, G., III, MARINO, MICHAEL, A
Format:	Patent
Sprache:	eng ; fre
Schlagworte:	APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY BEER BIOCHEMISTRY CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOIDCHEMISTRY CHEMISTRY COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR COMPOSITIONS THEREOF CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES CULTURE MEDIA ENZYMOLOGY INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES MEASURING MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS METALLURGY MICROBIOLOGY MICROORGANISMS OR ENZYMES MUTATION OR GENETIC ENGINEERING PERFORMING OPERATIONS PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL PHYSICS PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS SEPARATION SPIRITS TESTING THEIR RELEVANT APPARATUS TRANSPORTING VINEGAR WINE
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Beschreibung
Zusammenfassung:	Methods, systems, compositions and kits for improved detection of polynucleotides. In one aspect, there is provided a method for separating polynucleotides (such as DNA or RNA) using a liquid chromatographic separation device (such as a reverse phase column or an ion exchange column), contacting eluted polynucleotides with intercalating dye, and detecting (such as by fluorescence detection) dye bound to the eluted polynucleotides. The invention preferably uses a post-column reactor, such as a mixing tee, downstream of the separation column. Sensitivity of mutation detection by denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC) is enhanced. La présente invention concerne des procédés, des systèmes, des compositions et des trousses permettant une détection améliorée de polynucléotides. Dans un aspect, l'invention concerne un procédé qui permet de séparer des polynucléotides (ADN ou ARN, par exemple) à l'aide d'une dispositif de séparation par chromatographie en phase liquide (comme une colonne à phase inversée ou une colonne échangeuse d'ions), de mettre en contact les polynucléotides élués avec un colorant intercalant, et de détecter (par détection de fluorescence, par exemple) le colorant lié aux polynucléotides élués. L'invention fait de préférence appel à un réacteur post-colonne, par exemple un té mitigeur, en aval de la colonne de séparation. L'invention permet d'augmenter la sensibilité de détection des mutations de la chromatographie liquide à haute performance en conditions dénaturantes (DHPLC).