Method for Removal of Impurities from Bacterial Capsular Polysaccharide Based Preparations

يتعلق الاختراع الحالى بعملية محسنة لتنقية لمتعددات السكريات الكبسولية البكتيرية bacterial capsular polysaccharides ، وعلى وجه الخصوص متعددات سكريات كبسولية من بكتريا سالبة جرام . تشمل العملية تركيز و ترشيح الناتج ، المعالجة بمنظف انيونى anionic detergent و قلوى قوى strong alkali تلاها بالطرد المركزى centrifugation ، الترشيح و مستحضر معتمد على منظف كاتيونى cationic detergent لمتعددات سكريات بكتيرية . تؤدى العملية إلى نقص واضح للسموم الداخلية endotoxin ، شوائب بروتين protein impurities و حمض نووى nucleic acid impurities و بالتالى ايجاد تحصيل عالى لمتعدد سكريات كبسولى capsular polysaccharide مع مستويات O ــ استيل acetyl levels المطلوب . هذه العملية تكون قابلة للتوسع scalable ، غير انزيمية non-enzymatic و تستخدم خطوات تنقية أقل . شكل 1. The present invention relates to an improved process for purification of bacterial capsular polysaccharides, more specifically capsular polysaccharides of gram negative bacteria. The process comprises of concentration and diafiltration of harvest, treatment with anionic detergent and strong alkali followed by centrifugation, diafiltration and cationic detergent based precipitation of bacterial polysaccharides. The process results in significant reduction of endotoxin, protein and nucleic acid impurities thereby providing higher recovery of capsular polysaccharide with the desired O-acetyl levels. Said process is scalable, non-enzymatic, and employs fewer purification steps. Fig 1.