CLONE OF CULTIVATED HYBRID ANIMAL CELLS MUS MUSCULUS L.H-24-PRODUCER OF MONOCLONAL ANTIBODIES SPECIFIC TO STAPHYLOCOCCAL ENTEROTOXIN H (SEH)

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to microbiology and biotechnology, namely to hybridoma technology. Invention represents cultivated hybrid H-24 cell clone producing in environment of cell culture and abdominal cavity of syngeneic animals monoclonal antibody (MA) H-24 to SEH. Clone is produced by fusion of cells of mouse myeloma SP-2/0 with popliteal lymph node cells of BALB/c mice immunized with SEH subcutaneously. Fusing agent is polyethylene glycol with molecular weight of 1,500. Hybridoma selection has been performed on medium DMEM with bovine foetal serum and addition of hypoxantine-aminopterin-thymidine. Hybridoma synthesizes MA, specifically interacting with SEH. Antibody titre in culture liquid reaches no less than 1:10,000 1:20,000, in ascitic one it is no less than 1:1,000,000. Antibodies can be used for designing immunochemical SEH detection systems. In version of sandwich ELISA using biotinylated MA detection of H-18 and streptavidin peroxidase SEH is detected in concentration range from 0.2 (minimum limit of determination) up to 3 ng/ml.EFFECT: invention can be used for detection of staphylococcal enterotoxin H (SEH).1 cl, 3 dwg, 1 tbl, 7 ex Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, в частности к гибридомной технологии. Изобретение представляет собой клон культивируемых гибридных клеток Н-24, продуцирующий в условиях клеточной культуры и брюшных полостей сингенных животных моноклональное антитело (МА) Н-24 к SEH. Клон получен путем слияния клеток мышиной миеломы SP-2/0 с клетками подколенных лимфоузлов мышей линии BALB/c, иммунизированных SEH подкожно. В качестве сливающего агента был использован полиэтиленгликоль с молекулярной массой 1500. Селекция гибридомы проведена на среде ДМЕМ с добавлением сыворотки плода коровы и гипоксантина-аминоптерина-тимидина. Гибридома синтезирует МА, специфически взаимодействующие с SEH. Титр антител в культуральной жидкости достигает не менее 1:10000 1:20000, в асцитной - не менее 1:1000000. Антитела могут быть использованы для конструирования иммунохимических систем детекции SEH. В варианте сэндвич иммуноферментного анализа с использованием биотинилированных МА детекции Н-18 и стрептавидин пероксидазы SEH выявляется в диапазоне концентраций от 0,2 (минимальный предел определения) до 3 нг/мл. Изобретение может быть использовано для обнаружения стафилококкового энтеротоксина Н (SEH). 3 ил., 1 табл., 7 пр.