METHOD TO DETECT AVAILABILITY OF BACTERIA Escherichia coli O157:H7 IN BIOLOGICAL AND FOOD SAMPLES BASED ON IMMUNODETECTION COUPLED WITH POLYMERASE CHAIN REACTION

FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: method is proposed to detect availability of bacteria Escherichia coli of strain O157:H7 in biological fluids, environment and food, including disintegration of bacteria with fermentative treatment and lysis by a non-ionic detergent, adsorption on paramagnetic parti...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser:	KOLESNIKOV ALEKSANDR VLADIMIROVICH, SHEMJAKIN IGOR' GEORGIEVICH, DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH, KRASAVTSEVA OL'GA NIKOLAEVNA, LUNEVA NINA MIKHAJLOVNA, RJABKO ALENA KONSTANTINOVNA, SAVCHENKO GALINA ALEKSANDROVNA, ZHARNIKOVA IRINA VIKTOROVNA, KOZYR' ARINA VLADIMIROVNA, KHLYNTSEVA ANNA EVGEN'EVNA
Format:	Patent
Sprache:	eng ; rus
Schlagworte:	BEER BIOCHEMISTRY CHEMISTRY COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES ENZYMOLOGY INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES MEASURING MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS METALLURGY MICROBIOLOGY MUTATION OR GENETIC ENGINEERING PHYSICS PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS PROCESSES USING MICROORGANISMS SPIRITS TESTING VINEGAR WINE
Online-Zugang:	Volltext bestellen
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!

Beschreibung
Zusammenfassung:	FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: method is proposed to detect availability of bacteria Escherichia coli of strain O157:H7 in biological fluids, environment and food, including disintegration of bacteria with fermentative treatment and lysis by a non-ionic detergent, adsorption on paramagnetic particles with the help of a specific monoclonal antibody, detection of antigen of bacteria E.coli O157:H7 with the help of a specific biotin-modified antibody, coupling of the produced complex with non-covalent conjugate of DNA-matrix with neutravidine, dissociation of solid-phase complex "antibody-antigen E.coli O157:H7 - biotin-modified antibody-conjugate" with addition of solution of glycine - HCl pH 2.6, PCR-amplification of DNA-matrix and detection of availability of bacteria E.coli O157:H7 by speed of fluorescent signal increase.EFFECT: method has high specificity and sensitivity of detection and may be used in early diagnostics of haemorrhagic colitis and sanitary-hygienic control over availability of its inducer.5 dwg, 8 ex Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ определения наличия в биологических жидкостях, окружающей среде и продуктах питания бактерийштамма O157:Н7, включающий дезинтеграцию бактерий ферментативной обработкой и лизис неионным детергентом, адсорбцию на парамагнитных частицах при помощи специфического моноклонального антитела, детекцию антигена бактерийO157:Н7 при помощи специфического биотинилированного моноклонального антитела, связывание полученного комплекса с нековалентным коньюгатом ДНК-матрицы с нейтравидином, диссоциацию твердофазного комплекса "антитело-антигенO157:Н7 - биотинилированное антитело-коньюгат" добавлением раствора глицин - HCl рН 2.6, ПЦР-амплификацию ДНК-матрицы и выявление наличия бактерийO157:Н7 по скорости нарастания флуоресцентного сигнала. Данный способ отличается высокой специфичностью и чувствительностью детекции и может быть использован в ранней диагностике геморрагического колита и санитарно-гигиеническом контроле над наличием его возбудителя. 5 ил., 8 пр.