METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. A method for producing phague SPZ7 enzymes from the collection of Federal State Institution State Scientific Centre of Applied Microbiology and Biotechnology implies as follows: the culture Salmonella enteritidis is introduced into Hot...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH, POPOV DENIS VIKTOROVICH, LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH, ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH, LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH, DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH, KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA, MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA, LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH, POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA, BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA, PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH, SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH
Format: Patent
Sprache:eng ; rus
Schlagworte:
Online-Zugang:Volltext bestellen
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
container_end_page
container_issue
container_start_page
container_title
container_volume
creator REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH
POPOV DENIS VIKTOROVICH
LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH
ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH
LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH
DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH
KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA
MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA
LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH
POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA
BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA
PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH
SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH
description FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. A method for producing phague SPZ7 enzymes from the collection of Federal State Institution State Scientific Centre of Applied Microbiology and Biotechnology implies as follows: the culture Salmonella enteritidis is introduced into Hottinger's broth and grown. The grown culture is added with the purified phagolysate SPZ7 and cultured with aeration. The Salmonella enteritidis cells are deposited in a centrifuge. The produced cells are placed in tris-HCl buffer mixture 0.05 M of pH 7.0 containing ribonuclease, and cultured. It is added with ethylenediaminetetraacetate to the concentration of 5 mM; the prepared suspension is centrifuged; the supernatant is separated from the residue and fultered. Then the enzyme is deposited by adding (NH4)2SO4 to 100% saturation at temperature 0C. Residual protein is dissolved in the buffer mixture; the prepared enzyme solution is introduced in a chromatographic column with modified dextrane balanced by the buffer mixture tris-HCl 0.02 M pH=7.5 containing NaCl 0.15 M and ethylenediaminetetraacetate 1 mM; chromatographic separation is performed at eluent feed rate 24 ml/h; the prepared enzyme solution is further purified by ion-exchange chromatography. Chromatographic separation is performed at temperature 2-3C at eluent feed rate 35 ml/h; fractions containing 70% of total enzyme activity are separated and combined. ^ EFFECT: invention enables avoiding many contra-indications and side effects observed when using live phague preparations. Изобретение относится к биохимии. Способ получения ферментов фага SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии", заключается в следующем. В бульон Хоттингера вносят культуру Salmonella enteritidis и подращивают ее. В полученную культуру добавляют очищенный фаголизат SPZ7 и культивируют с аэрацией. Осаждают клетки Salmonella enteritidis на центрифуге. Полученные клетки помещают в 0,05 М трис-HCl буферную смесь с рН 7,0, содержащую рибонуклеазу, культивируют. Добавляют этилендиаминтетраацетат до концентрации 5 мМ и полученную суспензию центрифугируют, супернатант отделяют от осадка и фильтруют. Затем фермент осаждают добавлением (NH4)2SO4 до 100%-ного насыщения при температуре 0°С. Осадок белка растворяют в буферной смеси, полученный раствор фермента вносят в хроматографическую колонку с декстраном модифицированным, уравновешенным буферн
format Patent
fullrecord <record><control><sourceid>epo_EVB</sourceid><recordid>TN_cdi_epo_espacenet_RU2460537C2</recordid><sourceformat>XML</sourceformat><sourcesystem>PC</sourcesystem><sourcerecordid>RU2460537C2</sourcerecordid><originalsourceid>FETCH-epo_espacenet_RU2460537C23</originalsourceid><addsrcrecordid>eNrjZNDwdQ3x8HdRcPMPUggI8ncJdfb0c1cI8HB0D3VVCA6IMldw9YuK9HUN5mFgTUvMKU7lhdLcDApuriHOHrqpBfnxqcUFicmpeakl8UGhRiZmBqbG5s5GxkQoAQDJvSPj</addsrcrecordid><sourcetype>Open Access Repository</sourcetype><iscdi>true</iscdi><recordtype>patent</recordtype></control><display><type>patent</type><title>METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES</title><source>esp@cenet</source><creator>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH ; POPOV DENIS VIKTOROVICH ; LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH ; ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH ; LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH ; DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH ; KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA ; MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA ; LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH ; POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA ; BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA ; PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH ; SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</creator><creatorcontrib>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH ; POPOV DENIS VIKTOROVICH ; LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH ; ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH ; LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH ; DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH ; KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA ; MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA ; LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH ; POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA ; BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA ; PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH ; SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</creatorcontrib><description>FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. A method for producing phague SPZ7 enzymes from the collection of Federal State Institution State Scientific Centre of Applied Microbiology and Biotechnology implies as follows: the culture Salmonella enteritidis is introduced into Hottinger's broth and grown. The grown culture is added with the purified phagolysate SPZ7 and cultured with aeration. The Salmonella enteritidis cells are deposited in a centrifuge. The produced cells are placed in tris-HCl buffer mixture 0.05 M of pH 7.0 containing ribonuclease, and cultured. It is added with ethylenediaminetetraacetate to the concentration of 5 mM; the prepared suspension is centrifuged; the supernatant is separated from the residue and fultered. Then the enzyme is deposited by adding (NH4)2SO4 to 100% saturation at temperature 0C. Residual protein is dissolved in the buffer mixture; the prepared enzyme solution is introduced in a chromatographic column with modified dextrane balanced by the buffer mixture tris-HCl 0.02 M pH=7.5 containing NaCl 0.15 M and ethylenediaminetetraacetate 1 mM; chromatographic separation is performed at eluent feed rate 24 ml/h; the prepared enzyme solution is further purified by ion-exchange chromatography. Chromatographic separation is performed at temperature 2-3C at eluent feed rate 35 ml/h; fractions containing 70% of total enzyme activity are separated and combined. ^ EFFECT: invention enables avoiding many contra-indications and side effects observed when using live phague preparations. Изобретение относится к биохимии. Способ получения ферментов фага SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии", заключается в следующем. В бульон Хоттингера вносят культуру Salmonella enteritidis и подращивают ее. В полученную культуру добавляют очищенный фаголизат SPZ7 и культивируют с аэрацией. Осаждают клетки Salmonella enteritidis на центрифуге. Полученные клетки помещают в 0,05 М трис-HCl буферную смесь с рН 7,0, содержащую рибонуклеазу, культивируют. Добавляют этилендиаминтетраацетат до концентрации 5 мМ и полученную суспензию центрифугируют, супернатант отделяют от осадка и фильтруют. Затем фермент осаждают добавлением (NH4)2SO4 до 100%-ного насыщения при температуре 0°С. Осадок белка растворяют в буферной смеси, полученный раствор фермента вносят в хроматографическую колонку с декстраном модифицированным, уравновешенным буферной смесью 0,02 М трис-HCl с рН 7,5, содержащей 0,15 М Nad и 1 мМ этилендиаминтетраацетата, хроматографическое разделение производят со скоростью подачи элюента - 24 мл/ч, полученный раствор фермента подвергают дальнейшей очистке с помощью ионообменной хроматографии. Хроматографическое разделение производят при температуре 2-3°С со скоростью подачи элюента - 35 мл/ч, выделяют и объединяют фракции, содержащие 70% общей активности фермента. Изобретение позволяет исключить множественные противопоказания и побочные эффекты, имеющие место при применении препаратов живых фагов.</description><language>eng ; rus</language><subject>BEER ; BIOCHEMISTRY ; CHEMISTRY ; COMPOSITIONS THEREOF ; CULTURE MEDIA ; ENZYMOLOGY ; HUMAN NECESSITIES ; HYGIENE ; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE ; METALLURGY ; MICROBIOLOGY ; MICROORGANISMS OR ENZYMES ; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING ; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES ; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS ; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS ; SPIRITS ; VINEGAR ; WINE</subject><creationdate>2012</creationdate><oa>free_for_read</oa><woscitedreferencessubscribed>false</woscitedreferencessubscribed></display><links><openurl>$$Topenurl_article</openurl><openurlfulltext>$$Topenurlfull_article</openurlfulltext><thumbnail>$$Tsyndetics_thumb_exl</thumbnail><linktohtml>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&amp;date=20120910&amp;DB=EPODOC&amp;CC=RU&amp;NR=2460537C2$$EHTML$$P50$$Gepo$$Hfree_for_read</linktohtml><link.rule.ids>230,309,782,887,25571,76555</link.rule.ids><linktorsrc>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&amp;date=20120910&amp;DB=EPODOC&amp;CC=RU&amp;NR=2460537C2$$EView_record_in_European_Patent_Office$$FView_record_in_$$GEuropean_Patent_Office$$Hfree_for_read</linktorsrc></links><search><creatorcontrib>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>POPOV DENIS VIKTOROVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</creatorcontrib><title>METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES</title><description>FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. A method for producing phague SPZ7 enzymes from the collection of Federal State Institution State Scientific Centre of Applied Microbiology and Biotechnology implies as follows: the culture Salmonella enteritidis is introduced into Hottinger's broth and grown. The grown culture is added with the purified phagolysate SPZ7 and cultured with aeration. The Salmonella enteritidis cells are deposited in a centrifuge. The produced cells are placed in tris-HCl buffer mixture 0.05 M of pH 7.0 containing ribonuclease, and cultured. It is added with ethylenediaminetetraacetate to the concentration of 5 mM; the prepared suspension is centrifuged; the supernatant is separated from the residue and fultered. Then the enzyme is deposited by adding (NH4)2SO4 to 100% saturation at temperature 0C. Residual protein is dissolved in the buffer mixture; the prepared enzyme solution is introduced in a chromatographic column with modified dextrane balanced by the buffer mixture tris-HCl 0.02 M pH=7.5 containing NaCl 0.15 M and ethylenediaminetetraacetate 1 mM; chromatographic separation is performed at eluent feed rate 24 ml/h; the prepared enzyme solution is further purified by ion-exchange chromatography. Chromatographic separation is performed at temperature 2-3C at eluent feed rate 35 ml/h; fractions containing 70% of total enzyme activity are separated and combined. ^ EFFECT: invention enables avoiding many contra-indications and side effects observed when using live phague preparations. Изобретение относится к биохимии. Способ получения ферментов фага SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии", заключается в следующем. В бульон Хоттингера вносят культуру Salmonella enteritidis и подращивают ее. В полученную культуру добавляют очищенный фаголизат SPZ7 и культивируют с аэрацией. Осаждают клетки Salmonella enteritidis на центрифуге. Полученные клетки помещают в 0,05 М трис-HCl буферную смесь с рН 7,0, содержащую рибонуклеазу, культивируют. Добавляют этилендиаминтетраацетат до концентрации 5 мМ и полученную суспензию центрифугируют, супернатант отделяют от осадка и фильтруют. Затем фермент осаждают добавлением (NH4)2SO4 до 100%-ного насыщения при температуре 0°С. Осадок белка растворяют в буферной смеси, полученный раствор фермента вносят в хроматографическую колонку с декстраном модифицированным, уравновешенным буферной смесью 0,02 М трис-HCl с рН 7,5, содержащей 0,15 М Nad и 1 мМ этилендиаминтетраацетата, хроматографическое разделение производят со скоростью подачи элюента - 24 мл/ч, полученный раствор фермента подвергают дальнейшей очистке с помощью ионообменной хроматографии. Хроматографическое разделение производят при температуре 2-3°С со скоростью подачи элюента - 35 мл/ч, выделяют и объединяют фракции, содержащие 70% общей активности фермента. Изобретение позволяет исключить множественные противопоказания и побочные эффекты, имеющие место при применении препаратов живых фагов.</description><subject>BEER</subject><subject>BIOCHEMISTRY</subject><subject>CHEMISTRY</subject><subject>COMPOSITIONS THEREOF</subject><subject>CULTURE MEDIA</subject><subject>ENZYMOLOGY</subject><subject>HUMAN NECESSITIES</subject><subject>HYGIENE</subject><subject>MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE</subject><subject>METALLURGY</subject><subject>MICROBIOLOGY</subject><subject>MICROORGANISMS OR ENZYMES</subject><subject>MUTATION OR GENETIC ENGINEERING</subject><subject>PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES</subject><subject>PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS</subject><subject>SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS</subject><subject>SPIRITS</subject><subject>VINEGAR</subject><subject>WINE</subject><fulltext>true</fulltext><rsrctype>patent</rsrctype><creationdate>2012</creationdate><recordtype>patent</recordtype><sourceid>EVB</sourceid><recordid>eNrjZNDwdQ3x8HdRcPMPUggI8ncJdfb0c1cI8HB0D3VVCA6IMldw9YuK9HUN5mFgTUvMKU7lhdLcDApuriHOHrqpBfnxqcUFicmpeakl8UGhRiZmBqbG5s5GxkQoAQDJvSPj</recordid><startdate>20120910</startdate><enddate>20120910</enddate><creator>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH</creator><creator>POPOV DENIS VIKTOROVICH</creator><creator>LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH</creator><creator>ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH</creator><creator>LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH</creator><creator>DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH</creator><creator>KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA</creator><creator>MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA</creator><creator>LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH</creator><creator>POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA</creator><creator>BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA</creator><creator>PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH</creator><creator>SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</creator><scope>EVB</scope></search><sort><creationdate>20120910</creationdate><title>METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES</title><author>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH ; POPOV DENIS VIKTOROVICH ; LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH ; ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH ; LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH ; DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH ; KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA ; MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA ; LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH ; POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA ; BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA ; PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH ; SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</author></sort><facets><frbrtype>5</frbrtype><frbrgroupid>cdi_FETCH-epo_espacenet_RU2460537C23</frbrgroupid><rsrctype>patents</rsrctype><prefilter>patents</prefilter><language>eng ; rus</language><creationdate>2012</creationdate><topic>BEER</topic><topic>BIOCHEMISTRY</topic><topic>CHEMISTRY</topic><topic>COMPOSITIONS THEREOF</topic><topic>CULTURE MEDIA</topic><topic>ENZYMOLOGY</topic><topic>HUMAN NECESSITIES</topic><topic>HYGIENE</topic><topic>MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE</topic><topic>METALLURGY</topic><topic>MICROBIOLOGY</topic><topic>MICROORGANISMS OR ENZYMES</topic><topic>MUTATION OR GENETIC ENGINEERING</topic><topic>PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES</topic><topic>PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS</topic><topic>SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS</topic><topic>SPIRITS</topic><topic>VINEGAR</topic><topic>WINE</topic><toplevel>online_resources</toplevel><creatorcontrib>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>POPOV DENIS VIKTOROVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA</creatorcontrib><creatorcontrib>PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH</creatorcontrib><creatorcontrib>SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</creatorcontrib><collection>esp@cenet</collection></facets><delivery><delcategory>Remote Search Resource</delcategory><fulltext>fulltext_linktorsrc</fulltext></delivery><addata><au>REPIN VLADIMIR EVGEN'EVICH</au><au>POPOV DENIS VIKTOROVICH</au><au>LEVASHOV ANDREJ VADIMOVICH</au><au>ZHILENKOV EVGENIJ LEONIDOVICH</au><au>LEVASHOV PAVEL ANDREEVICH</au><au>DJATLOV IVAN ALEKSEEVICH</au><au>KLJACHKO NATAL'JA L'VOVNA</au><au>MOROZOVA OL'GA ALEKSEEVNA</au><au>LEGOTSKIJ SERGEJ ALEKSANDROVICH</au><au>POPOVA VALENTINA MIKHAJLOVNA</au><au>BELOGUROVA NATAL'JA GEORGIEVNA</au><au>PUGACHEV VLADIMIR GEORGIEVICH</au><au>SEDOV SERGEJ ALEKSEEVICH</au><format>patent</format><genre>patent</genre><ristype>GEN</ristype><title>METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES</title><date>2012-09-10</date><risdate>2012</risdate><abstract>FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. A method for producing phague SPZ7 enzymes from the collection of Federal State Institution State Scientific Centre of Applied Microbiology and Biotechnology implies as follows: the culture Salmonella enteritidis is introduced into Hottinger's broth and grown. The grown culture is added with the purified phagolysate SPZ7 and cultured with aeration. The Salmonella enteritidis cells are deposited in a centrifuge. The produced cells are placed in tris-HCl buffer mixture 0.05 M of pH 7.0 containing ribonuclease, and cultured. It is added with ethylenediaminetetraacetate to the concentration of 5 mM; the prepared suspension is centrifuged; the supernatant is separated from the residue and fultered. Then the enzyme is deposited by adding (NH4)2SO4 to 100% saturation at temperature 0C. Residual protein is dissolved in the buffer mixture; the prepared enzyme solution is introduced in a chromatographic column with modified dextrane balanced by the buffer mixture tris-HCl 0.02 M pH=7.5 containing NaCl 0.15 M and ethylenediaminetetraacetate 1 mM; chromatographic separation is performed at eluent feed rate 24 ml/h; the prepared enzyme solution is further purified by ion-exchange chromatography. Chromatographic separation is performed at temperature 2-3C at eluent feed rate 35 ml/h; fractions containing 70% of total enzyme activity are separated and combined. ^ EFFECT: invention enables avoiding many contra-indications and side effects observed when using live phague preparations. Изобретение относится к биохимии. Способ получения ферментов фага SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии", заключается в следующем. В бульон Хоттингера вносят культуру Salmonella enteritidis и подращивают ее. В полученную культуру добавляют очищенный фаголизат SPZ7 и культивируют с аэрацией. Осаждают клетки Salmonella enteritidis на центрифуге. Полученные клетки помещают в 0,05 М трис-HCl буферную смесь с рН 7,0, содержащую рибонуклеазу, культивируют. Добавляют этилендиаминтетраацетат до концентрации 5 мМ и полученную суспензию центрифугируют, супернатант отделяют от осадка и фильтруют. Затем фермент осаждают добавлением (NH4)2SO4 до 100%-ного насыщения при температуре 0°С. Осадок белка растворяют в буферной смеси, полученный раствор фермента вносят в хроматографическую колонку с декстраном модифицированным, уравновешенным буферной смесью 0,02 М трис-HCl с рН 7,5, содержащей 0,15 М Nad и 1 мМ этилендиаминтетраацетата, хроматографическое разделение производят со скоростью подачи элюента - 24 мл/ч, полученный раствор фермента подвергают дальнейшей очистке с помощью ионообменной хроматографии. Хроматографическое разделение производят при температуре 2-3°С со скоростью подачи элюента - 35 мл/ч, выделяют и объединяют фракции, содержащие 70% общей активности фермента. Изобретение позволяет исключить множественные противопоказания и побочные эффекты, имеющие место при применении препаратов живых фагов.</abstract><oa>free_for_read</oa></addata></record>
fulltext fulltext_linktorsrc
identifier
ispartof
issn
language eng ; rus
recordid cdi_epo_espacenet_RU2460537C2
source esp@cenet
subjects BEER
BIOCHEMISTRY
CHEMISTRY
COMPOSITIONS THEREOF
CULTURE MEDIA
ENZYMOLOGY
HUMAN NECESSITIES
HYGIENE
MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE
METALLURGY
MICROBIOLOGY
MICROORGANISMS OR ENZYMES
MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS
SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS
SPIRITS
VINEGAR
WINE
title METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES
url https://sfx.bib-bvb.de/sfx_tum?ctx_ver=Z39.88-2004&ctx_enc=info:ofi/enc:UTF-8&ctx_tim=2024-12-04T16%3A31%3A56IST&url_ver=Z39.88-2004&url_ctx_fmt=infofi/fmt:kev:mtx:ctx&rfr_id=info:sid/primo.exlibrisgroup.com:primo3-Article-epo_EVB&rft_val_fmt=info:ofi/fmt:kev:mtx:patent&rft.genre=patent&rft.au=REPIN%20VLADIMIR%20EVGEN'EVICH&rft.date=2012-09-10&rft_id=info:doi/&rft_dat=%3Cepo_EVB%3ERU2460537C2%3C/epo_EVB%3E%3Curl%3E%3C/url%3E&disable_directlink=true&sfx.directlink=off&sfx.report_link=0&rft_id=info:oai/&rft_id=info:pmid/&rfr_iscdi=true