Method for preparation of a pharmaceutical composition containing BCG strain mycobacteria belonging to Mycobacterium bovis BCG of the Moreau sub-strain

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób wytwarzania kompozycji farmaceutycznej zawierającej kulturę bakteryjną szczepu BCG należące do Mycobacterium bovis BCG brazylijskiego podszczepu Moreau, polegający na ożywianiu prątków na podłożu, zawierającym kwas cytrynowy, asparaginę, dwupotasowy fosforan bezwodny, magnezu siarczan, amonu żelaza cytrynian, siarczan cynku, glicerol oraz inkubacji i przepasażowaniu uzyskanej hodowli prątków BCG, a także przepłukaniu otrzymanej masy bakteryjnej zbuforowanym roztworem chlorku sodu i dwufosforanu potasu. Sposób charakteryzuje się tym, że masę bakteryjną zawiesza się w nośniku stanowiącym co najwyżej 5% glutaminianu sodu, do otrzymania stężenia co najmniej 10 x 106 jtk/mg Mycobacterium bovis BCG brazylijskiego podszczepu Moreau, po czym prowadzi się proces homogenizacji poprzez intensywne rozcieranie kulkami stalowymi o średnicy 4 mm na mieszadle elektrycznym przez 5 - 10 minut przy obrotach 20 rpm/min i kącie nachylenia mieszadła 45°C, a następnie dozuje się do jednostkowych opakowań szklanych z korkami, po czym poddaje się trzyetapowemu procesowi liofilizacji, gdzie w pierwszym etapie produkt umieszczony w jednostkowych opakowaniach zamraża się do temperatury od -30°C do -40° C w czasie co najmniej 120 - 150 minut, po czym obniża się ciśnienie do wartości od 5 Pa abs do 15 Pa abs przy temperaturze płyt w zakresie 18°C - 28°C i temperaturze wymrażacza poniżej -50C w czasie co najmniej 12,0 - 13,5 godzin, a następnie prowadzi się proces ogrzewania do temperatury produktu od 35°C do 39°C, przy temperaturze płyt od 36°C do 46°C i temperaturze wymrażacza poniżej -50°C oraz przy ciśnieniu 0,5 do 2 Pa abs w czasie 25 - 30 godzin, po czym jednostkowe opakowania zamyka się szczelnie utrzymując podciśnienie o wartości od 0,8 Pa abs do 1,2 Pa abs.