비바이러스성 DNA 벡터 및 FVIII 치료제 발현을 위한 이의 용도

본 출원은 전이유전자의 전달 및 발현을 위한 선형 및 연속 구조를 갖는 ceDNA 벡터를 설명한다. ceDNA 벡터는 2개의 ITR 서열이 플랭킹된 발현 카세트를 포함하며, 여기서 발현 카세트는 FVIII 단백질을 인코딩하는 전이유전자를 인코딩한다. 일부 ceDNA 벡터는 조절 스위치를 포함하는 시스-조절 요소를 추가로 포함한다. ceDNA 벡터를 사용하여 시험관내, 생체외 및 생체내에서 FVIII 단백질의 신뢰할 수 있는 유전자 발현을 위한 방법 및 세포주가 본원에 추가로 제공된다. 세포, 조직 또는 대상에서 FVIII 단백질의 발현에 유용한 ceDNA 벡터를 포함하는 방법 및 조성물, 및 FVIII 단백질을 발현하는 상기 ceDNA 벡터로 질환을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 이러한 FVIII 단백질은 질환, 예를 들어 혈우병 A의 치료를 위해 발현될 수 있다. The application describes ceDNA vectors having linear and continuous structure for delivery and expression of a transgene. ceDNA vectors comprise an expression cassette flanked by two ITR sequences, where the expression cassette encodes a transgene encoding FVIII protein. Some ceDNA vectors further comprise cis-regulatory elements, including regulatory switches. Further provided herein are methods and cell lines for reliable gene expression of FVIII protein in vitro, ex vivo and in vivo using the ceDNA vectors. Provided herein are methods and compositions comprising ceDNA vectors useful for the expression of FVIII protein in a cell, tissue or subject, and methods of treatment of diseases with said ceDNA vectors expressing FVIII protein. Such FVIII protein can be expressed for treating disease, e.g., hemophilia A.