METHOD OF DETECTING A MARKER FOR DIAGNOSING RHEUMATOID ARTHRITIS USING AN IMMUNOASSAY BASED ON A SURFACE-ENHANCED RAMAN SCATTERING
Provided in the present invention is a method to detect a rheumatism marker through a surface enhanced Raman scattering (SERS) based immunoassay comprising: a step of preparing a test sample solution expected to contain an autoantibody, an anti-cyclic citrullinated peptide (CCP) antibody; a step of...
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Format: | Patent |
Sprache: | eng ; kor |
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Zusammenfassung: | Provided in the present invention is a method to detect a rheumatism marker through a surface enhanced Raman scattering (SERS) based immunoassay comprising: a step of preparing a test sample solution expected to contain an autoantibody, an anti-cyclic citrullinated peptide (CCP) antibody; a step of preparing magnetic particles fixated with a cyclic citrullinated peptide (CCP) specifically combined with the anti-CCP antibody; a step of preparing a nanoprobe combined with a secondary antibody which is specifically combined with the anti-CCP antibody and a Raman reporter molecule; a step of forming a first immune complex through an immune reaction by CCP of the magnetic particles and the anti-CCP antibody by adding the magnetic particles in the test sample solution; a step of forming a sandwich immune complex through a combination of the secondary antibody of the nanoprobe and the anti-CCP antibody of the first immune complex; a step of separating the sandwich complex using magnetism; a step of radiating a laser beam to the separated sandwich immune complex; and a step of confirming an existence of the autoantibody, the anti-CCP antibody by measuring surface-enhanced Raman scattering (SERS) signals after radiating with the laser beam.
본 발명은 자가항체 항-CCP(cyclic citrullinated peptide) 항체가 포함된 것으로 예상되는 시료액을 준비하고; 상기 항-CCP 항체에 특이적으로 결합하는 CCP(cyclic citrullinated peptide)가 고정화된 자성 입자를 준비하고; 상기 항-CCP 항체에 특이적으로 결합하는 2차 항체와 라만 리포터 분자가 결합된 나노 프로브를 준비하고; 상기 시료액에 상기 자성 입자를 첨가하여 상기 자성 입자의 CCP와 상기 항-CCP 항체가 면역반응을 하여 제 1 면역복합체를 형성하고; 상기 제1 면역복합체가 형성된 시료액에 상기 나노 프로브를 첨가하여 상기 나노 프로브의 2차 항체와 상기 제1 면역복합체 상의 항-CCP 항체가 결합하여 샌드위치 면역복합체를 형성하고; 상기 샌드위치 면역복합체를 자성을 이용하여 분리하고; 상기 분리된 샌드위치 면역복합체에 레이저 광을 조사하고; 그리고 상기 레이저광 조사 이후에 표면-증강 라만 산란(surface-enhanced Raman scattering: SERS) 신호를 측정하여 상기 자가항체 항-CCP 항체의 존재를 확인하는 단계;를 포함하는 SERS 기반의 면역분석에 의한 류마티즘 마커 검출 방법을 제공한다. |
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