TERPENE SYNTHASE GENE, ACETOACETIC ESTER HYDROLASE GENE, AND MANUFACTURING METHOD OF TERPENE

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a manufacturing method of terpene by obtaining a new enzyme gene required for the synthesis of sesquiterpene or monoterpene from FPP or GPP to manufacture terpene by using the obtained newly synthesized enzyme gene, a method efficiently producing terpene in a recombinant coliform bacillus producing terpene, and a method by newly finding out an acetoacetic ester hydrolase gene to use an acetoacetic ester so as to efficiently produce terpene by using the gene.SOLUTION: This invention comprises: manufacturing a kind of sesquiterpene having bioactivation useful for a human such as valerianol, hedicalol, α-selinene, α-copaene, β-ocimene and α-farnesene, and a kind of monoterpene having bioactivation useful for a human such as linalool by using a valerianol/hedicalol synthase gene newly obtained, an α-selinene synthase gene, an α-copaene synthase gene, a β-ocimene/α-farnesene gene, and a linalool synthase gene; collecting and purifying terpene efficiently by cultivating 8-10C n-alkane overlapped in a culture medium; enhancing a production quantity of carotenoid of Carotenoid producing coliform bacillus by adding sugar to the culture medium; and a method efficiently manufacturing terpene by using enzyme protein and gene thereof having enzymatic activity capable of hydrolyzing acetoacetic acid methyl ester and acetoacetic acid ethyl ester.SELECTED DRAWING: None 【課題】FPP又はGPPからセスキテルペン又はモノテルペンの合成に必要な新規酵素遺伝子を取得すること、取得した新規合成酵素遺伝子を利用して、テルペンを製造する方法を提供すること。テルペンを産生する組換え大腸菌において、テルペンを効率的に製造する方法を提供すること。アセト酢酸エステルを利用するため、アセト酢酸エステル加水分解酵素遺伝子を新たに見出し、及び該遺伝子を利用して、テルペンを効率的に製造する方法を提供すること。【解決手段】新たに取得したバレリアノール/ヘディカルオール合成酵素遺伝子、α-セリネン合成酵素遺伝子、α-コパエン合成酵素遺伝子、β-オシメン/α-ファルネセン遺伝子、及びリナロール合成酵素遺伝子を利用して、ヒトに有用な生理活性のあるセスキテルペンの一種である、バレリアノール、ヘディカルオール、α-セリネン、α-コパエン、β-オシメン及びα-ファルネセン、及びヒトに有用な生理活性のあるモノテルペンの一種であるリナロールを製造できること、炭素数８〜１０のn-アルカンを培地に重層して培養することで、テルペンを効率的に回収・精製できること、培地に糖を添加して培養することでカロテノイド産生大腸菌のカロテノイド産生量を増強できること、並びにアセト酢酸メチルエステル及びアセト酢酸エチルエステルを加水分解できる酵素活性を有する酵素タンパク質及びその遺伝子を利用して、テルペンを効率的に製造する方法を見出し、本発明を完成した。【選択図】なし