Purificación de anticuerpos y monitorización de la pureza

Un proceso de fermentación para producir un polipéptido recombinante deseado y purificar el polipéptido recombinante deseado del medio de fermentación, en donde el proceso incluye: (i) cultivar células o microbios huésped en condiciones que den como resultado la expresión y secreción del polipéptido recombinante y una o más impurezas en el medio de fermentación; (ii) obtener periódicamente una o más muestras del medio de fermentación a medida que avanza el proceso de fermentación o después de que se realicen diferentes ciclos de fermentación; (iii) detectar la cantidad y/o tipo de impurezas glicosiladas en la o las muestras usando una lectina que se une a dichas impurezas glicosiladas, y (iv) en función de la cantidad de impurezas glicosiladas detectadas en la o las muestras, modificar uno o más de los parámetros de operación o condiciones del proceso de fermentación, en donde las células o microbios huésped son levaduras u hongos filamentosos, en donde el polipéptido recombinante es un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, en donde en función de la cantidad de impurezas glicosiladas detectadas, se altera uno o más de los siguientes parámetros o condiciones del proceso de fermentación: temperatura, pH, constituyente gaseoso, constituyente de alimentación, agitación, aireación, antiespumante y duración, en donde el proceso incluye además recuperar o purificar el polipéptido recombinante del medio de fermentación, y en donde el proceso de purificación comprende además la combinación de diferentes muestras o eluatos o fracciones de los mismos que contienen el polipéptido recombinante deseado en función de la cantidad y/o tipo de impurezas glicosiladas detectadas en relación con la cantidad del polipéptido recombinante deseado. Processes for producing and purifying recombinant proteins are disclosed. In particular, the present disclosure provides processes of producing and purifying multi-subunit proteins expressed in yeast or filamentous fungal cells. The production and/or purification of such proteins are monitored for impurities, preferably using lectin binding assays, such that one or more process parameters may be adjusted to maximize the amount of desired recombinant protein and minimize the amount of glycosylated impurities. The processes can also be monitored for other undesired product-associated impurities, such as aggregates and nucleic acids. In exemplary embodiments, the recombinant proteins are multi-subunit proteins, such as antibodies, the host