Células madre pluripotentes

Un método para producir células madre pluripotentes de células derivadas del fluído amniótico sin el uso de una capa de células alimentadoras y sin el uso de un agente que aumente la eficiencia de transfección retroviral, comprendiendo; a) sembrar células humanas derivadas del fluído amniótico en un sustrato de cultivo de tejido; b) transducir las células sembradas derivadas del fluído amniótico con al menos un retrovirus que contiene ácido nucleico que codifica SOX2, OCT4, LIN28, y NANOG; c) cultivar las células transducidas, luego transferir las células transducidas en placas de cultivo de tejidos recubiertas de una protéina de matriz extracelular, y cultivar las células transferidas en medio suplementado con un agente que inhibe la actividad de quinasa Rho, y bFGF, durante una semana; y d) pasar las células cultivadas en placas de cultivo de tejido recubiertas de una proteína de matriz extracelular y cultivar las células pasadas en medio acondicionado que contiene factores solubles derivados de células alimentadoras y suplementados con bFGF, en donde las células son transducidas para introducir SOX2, OCT4, LIN28 y NANOG en las células. The present invention provides methods to produce pluripotent stem cells from adult cells. In particular, the present invention provides methods to produce pluripotent stem cells from somatic cells without the use of a feeder-cell layer or an agent that increases efficiency of retroviral transfection.