PURIFICACION DE PROTEINAS RECOMBINANTES FUSIONADAS CON EPITOPOS MULTIPLES

Polipéptido de identificación para ser usado en la purificación de una molécula de péptido diana, en el que el polipéptido de identificación comprende la secuencia de aminoácidos en la que: D, Y y K son sus aminoácidos representativos; X 20 es hidrógeno o un enlace; X 20 -(X 1 -Y-K-X 2 -X 3 -D-X 4 )...

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Hauptverfasser: HERNAN, RON, BRIZZARD, BILL
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:Polipéptido de identificación para ser usado en la purificación de una molécula de péptido diana, en el que el polipéptido de identificación comprende la secuencia de aminoácidos en la que: D, Y y K son sus aminoácidos representativos; X 20 es hidrógeno o un enlace; X 20 -(X 1 -Y-K-X 2 -X 3 -D-X 4 ) n-X 5 -(X 1 -Y-K-X 7 -X 8 -D-X 9 -K)-X 21 X 21 es hidrógeno o un enlace covalente que une el polipéptido de identificación a una molécula de péptido diana; cada X 1 y X 4 es de forma independiente un enlace o por lo menos un residuo de aminoácido seleccionado del grupo consistente en residuos de aminoácidos aromáticos y lisina, arginina, histidina, aspartato, glutamato, serina, treonina, cisteína, tirosina, asparagina y glutamina; cada X 2 , X 3 , X 7 y X 8 es de forma independiente un residuo de aminoácido seleccionado del grupo consistente en residuos de aminoácidos aromáticos y lisina, arginina, histidina, aspartato, glutamato, serina, treonina, cisteína, tirosina, asparagina y glutamina; X 5 es un enlace o un dominio espaciador que comprende por lo menos un residuo de aminoácido; X 9 es un enlace o un residuo de aspartato; y n es por lo menos 2, y en el que el sitio escindible representado por la secuencia X 7 -X 8 -D-X 9 -K no está situado en el, o interpuesto entre múltiples copias del, dominio antigénico X 1 -Y-K-X 2 -X 3 -D. The present invention provides novel identification polypeptides containing multiple copies of an antigenic domain joined in tandem to provide increased sensitivity for the detection and purification of target peptides, a cleavable linking sequence and optionally a spacer domain. Further provided are hybrid polypeptide molecules composed of an identification polypeptide and a target peptide which are produced by recombinant DNA technology and purified using affinity chromatography using one or more ligands. Accordingly, also provided are DNA expression vectors containing DNA encoding for identification polypeptides and methods for using such identification polypeptides for the purification of target peptides. Also provided are methods of constructing DNA vectors encoding the novel identification polypeptides and DNA expression vectors encoding the identification polypeptides linked to a target peptide.