GANGLIOSIDES FOR STANDARDIZING AND INCREASING THE SENSITIVITY OF CELLS TO BOTULINUM NEUROTOXINS IN IN VITRO TEST SYSTEMS
The present invention in one aspect pertains to a method for standardizing the sensitivity of induced pluripotent stem cell (iPS)-derived neurons to a neurotoxin polypeptide, comprising the steps of: a) measuring the sensitivity of neurons from different batches of induced pluripotent stem cell-deri...
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| creator | MANDER, GERD EISELE, KARL-HEINZ |
| description | The present invention in one aspect pertains to a method for standardizing the sensitivity of induced pluripotent stem cell (iPS)-derived neurons to a neurotoxin polypeptide, comprising the steps of: a) measuring the sensitivity of neurons from different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons to a neurotoxin polypeptide to establish variability in sensitivity across the different batches; b) cultivating neurons from said different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons in a cell culture medium comprising GT1b for at least 3 hours; c) contacting the neurons of step b) with a neurotoxin polypeptide; d) cultivating neurons of step c) for at least 24 hours in the presence of GT1b under conditions which allow for the neurotoxin polypeptide to exert its biological activity; e) measuring the sensitivity of the different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons to a neurotoxin polypeptide in step d) to establish a reduction in variability in sensitivity across the different batches relative to the variability in sensitivity across the different batches in step a).
La présente invention se rapporte à un procédé de normalisation de la sensibilité de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites (iPS) à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellule souches pluripotentes à un polypeptide de neurotoxine. La présente invention concerne en outre un procédé de génération de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ayant une sensibilité normalisée à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) fournir différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ; b) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) dans un milieu de culture cellu |
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La présente invention se rapporte à un procédé de normalisation de la sensibilité de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites (iPS) à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellule souches pluripotentes à un polypeptide de neurotoxine. La présente invention concerne en outre un procédé de génération de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ayant une sensibilité normalisée à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) fournir différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ; b) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine. De plus, la présente invention comprend un procédé de détermination de l'activité biologique d'un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver des neurones issus de cellules souches pluripotentes dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique ; et d) déterminer l'activité biologique du polypeptide de neurotoxine dans lesdites cellules. Enfin, la présente invention concerne l'utilisation du GT1b pour a) normaliser la sensibilité de différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine ; b) réduire la variabilité de la sensibilité de différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine.</description><language>eng ; fre</language><subject>BEER ; BIOCHEMISTRY ; CHEMISTRY ; COMPOSITIONS THEREOF ; CULTURE MEDIA ; ENZYMOLOGY ; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES ; MEASURING ; METALLURGY ; MICROBIOLOGY ; MICROORGANISMS OR ENZYMES ; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING ; PHYSICS ; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS ; SPIRITS ; TESTING ; VINEGAR ; WINE</subject><creationdate>2023</creationdate><oa>free_for_read</oa><woscitedreferencessubscribed>false</woscitedreferencessubscribed></display><links><openurl>$$Topenurl_article</openurl><openurlfulltext>$$Topenurlfull_article</openurlfulltext><thumbnail>$$Tsyndetics_thumb_exl</thumbnail><linktohtml>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&date=20230919&DB=EPODOC&CC=CA&NR=2940082C$$EHTML$$P50$$Gepo$$Hfree_for_read</linktohtml><link.rule.ids>230,308,776,881,25543,76294</link.rule.ids><linktorsrc>$$Uhttps://worldwide.espacenet.com/publicationDetails/biblio?FT=D&date=20230919&DB=EPODOC&CC=CA&NR=2940082C$$EView_record_in_European_Patent_Office$$FView_record_in_$$GEuropean_Patent_Office$$Hfree_for_read</linktorsrc></links><search><creatorcontrib>MANDER, GERD</creatorcontrib><creatorcontrib>EISELE, KARL-HEINZ</creatorcontrib><title>GANGLIOSIDES FOR STANDARDIZING AND INCREASING THE SENSITIVITY OF CELLS TO BOTULINUM NEUROTOXINS IN IN VITRO TEST SYSTEMS</title><description>The present invention in one aspect pertains to a method for standardizing the sensitivity of induced pluripotent stem cell (iPS)-derived neurons to a neurotoxin polypeptide, comprising the steps of: a) measuring the sensitivity of neurons from different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons to a neurotoxin polypeptide to establish variability in sensitivity across the different batches; b) cultivating neurons from said different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons in a cell culture medium comprising GT1b for at least 3 hours; c) contacting the neurons of step b) with a neurotoxin polypeptide; d) cultivating neurons of step c) for at least 24 hours in the presence of GT1b under conditions which allow for the neurotoxin polypeptide to exert its biological activity; e) measuring the sensitivity of the different batches of induced pluripotent stem cell-derived neurons to a neurotoxin polypeptide in step d) to establish a reduction in variability in sensitivity across the different batches relative to the variability in sensitivity across the different batches in step a).
La présente invention se rapporte à un procédé de normalisation de la sensibilité de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites (iPS) à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellule souches pluripotentes à un polypeptide de neurotoxine. 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De plus, la présente invention comprend un procédé de détermination de l'activité biologique d'un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver des neurones issus de cellules souches pluripotentes dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique ; et d) déterminer l'activité biologique du polypeptide de neurotoxine dans lesdites cellules. 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La présente invention se rapporte à un procédé de normalisation de la sensibilité de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites (iPS) à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellule souches pluripotentes à un polypeptide de neurotoxine. La présente invention concerne en outre un procédé de génération de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ayant une sensibilité normalisée à un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) fournir différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites ; b) cultiver les différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures, normalisant ainsi la sensibilité des neurones issus des cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine. De plus, la présente invention comprend un procédé de détermination de l'activité biologique d'un polypeptide de neurotoxine, comprenant les étapes consistant à : a) cultiver des neurones issus de cellules souches pluripotentes dans un milieu de culture cellulaire comprenant le GT1b pendant au moins 3 heures ; b) mettre en contact les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape a) avec un polypeptide de neurotoxine ; c) cultiver les neurones issus des cellules souches pluripotentes induites de l'étape b) pendant au moins 24 heures en présence du GT1b dans des conditions qui permettent au polypeptide de neurotoxine d'exercer son activité biologique ; et d) déterminer l'activité biologique du polypeptide de neurotoxine dans lesdites cellules. Enfin, la présente invention concerne l'utilisation du GT1b pour a) normaliser la sensibilité de différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine ; b) réduire la variabilité de la sensibilité de différents lots de neurones issus de cellules souches pluripotentes induites à un polypeptide de neurotoxine.</abstract><oa>free_for_read</oa></addata></record> |
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