Desarrollo y caracterización de un andamio hecho con un copolímero ácido poli-L/DL-láctico (PLDL) para ayudar a la regeneración de vasos sanguíneos

El presente proyecto comprende el estudio realizado sobre un andamio poroso construido a partir de un biomaterial sintético, biodegradable y reabsorbible: el copolímero ácido poli-L/DL-láctico (PLDL). Este andamio se crea a partir de un novedoso método basado en la obtención de un precipitado por separación de fases de un sistema gelificado constituido por los componentes PLDL (sólido) y lactato de etilo (solvente). Dicho proceso permite obtener un andamio de estructura nanofibrosa continua que imita la matriz extracelular, por lo que resulta un buen candidato para la creación de materiales biomiméticos. Recientemente, estudios realizados sobre células neuronales progenitoras han demostrado el efecto que tiene la liberación de ácido L-Láctico en la regulación de su adherencia, proliferación y diferenciación. Debido a que estos nuevos andamios tienen un elevado potencial en la creación de productos biomédicos para terapias regenerativas, el presente proyecto tiene como objetivo verificar si los subproductos de liberación tienen algún efecto tóxico sobre las células y si estos mismos productos ejercen algún efecto regulador sobre células endoteliales progenitoras (EPCs) que promueva la angiogénesis. Para conseguir este objetivo, se ha analizado la conformación estructural de los andamios a través de estudios de microporosimetría por inyección de mercurio (MIP), y del análisis de la superficie específica por la técnica de Brunauer, Emmett y Teller (BET). Además se ha evaluado la liberación de ácido L-Láctico por parte de los andamios (por absorción de UV), así como su efecto en la proliferación celular (técnica del AlamarBlue) y en la diferenciación (ELISA) de las EPCs. Para ello, se han expandido y cultivado EPCs en medios de cultivo condicionados con distintas concentraciones de L-Láctico obtenidas a partir de la degradación hidrolítica de los andamios, es decir sin contacto directo con éste. Los resultados obtenidos indican la obtención de andamios con elevadas porosidades (~80%) y superficies específicas (~54 m2.g-1). La concentración de ácido L-Láctico en medio de cultivo después de 1 día de condicionamiento se sitúa dentro de un rango 0,1-0,9 mM, sin variaciones sustanciales en el pH (6,95 - 7,20). Sobre el efecto de dicha liberación de L-Láctico sobre las EPCs se constata que no afecta a su proliferación pero tampoco tiene un efecto sobre la diferenciación de las EPCs. Los resultados apuntan a que esta nueva metodología permite obtener andamios de elev