Otimização do conjugado Anti-IGG canino no kit diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC): Vigil Sanit Debate, Rio de Janeiro, 2024, v.12: e02299| Publicado em: 11/10/2024
Introduction: The diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) is of great importance in the control of visceral leishmaniasis, a disease that is neglected worldwide and represents a significant public health problem. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test is widely used because of the...
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Veröffentlicht in: | Vigilância Sanitária em Debate 2024-10, p.1-8 |
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creator | De Amorim Chermont, Simone Jorge Nascimento, Hilton Lemos de Andrade, Marco Antonio Teixeira Pinto, Christiane Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos Alves Brayner Pereira, Kaique Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas Fernandes Delgado, Isabella |
description | Introduction: The diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) is of great importance in the control of visceral leishmaniasis, a disease that is neglected worldwide and represents a significant public health problem. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test is widely used because of the possibility of large-scale diagnosis and low cost. Objective: The objective of this study was to optimize the stoichiometry of the conjugate used in the EIE/CVL kit; for this purpose, some conjugation and monitoring parameters were modified through molecular exclusion chromatography to improve the final product. Method: The conjugate produced by Bio-Manguinhos was optimized by purification using SEC gel filtration chromatography and evaluated using the EIE-leishmaniasis-visceral-canine-Bio-Manguinhos kit (EIE-LVC). The conjugates were produced with different stoichiometries (IgG X peroxidase): current conjugate, optimized conjugate and optimized and purified conjugate. Results: The results obtained were validated using the manual Canine Visceral Leishmaniasis test. The homogeneity of the conjugate means in the ELISA test was evaluated using the chi-square test, thereby demonstrating the normality and reliability of the data. Based on statistical data, positive samples obtained by the ELISA test showed homogeneity at a significance level of 0.05, i.e. a data reliability level of 95%. The optimization of the production of the canine anti-IgG conjugate, an extremely important component used in the composition of the Bio-Manguinhos EIE LVC KIT, contributed to ensuring the quality of the kit and improving the diagnosis of canine visceral leishmaniasis disease, making it more sensitive and inexpensive for public health. Conclusions: This work demonstrates that it is possible to optimize the anti-IgG canine peroxidase (HRP) conjugate used in the EIE CVL kit to make it more specific and ultimately more economical.
Introdução: O diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) é de grande importância no controle da leishmaniose visceral, uma das doenças mais negligenciadas no mundo e de grande importância no campo da saúde pública. O teste Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) é amplamente utilizado pela possibilidade de diagnóstico em larga escala e baixo custo. Objetivo: Para otimizar a estequiometria do conjugado utilizado no kit EIE/CVL, foram modificados alguns parâmetros de conjugação e monitorização através de cromatografia de exclusão molecular no melhoramen |
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Introdução: O diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) é de grande importância no controle da leishmaniose visceral, uma das doenças mais negligenciadas no mundo e de grande importância no campo da saúde pública. O teste Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) é amplamente utilizado pela possibilidade de diagnóstico em larga escala e baixo custo. Objetivo: Para otimizar a estequiometria do conjugado utilizado no kit EIE/CVL, foram modificados alguns parâmetros de conjugação e monitorização através de cromatografia de exclusão molecular no melhoramento do produto final. Método: O conjugado produzido por Bio-Manguinhos por purificação foi otimizado utilizando a cromatografia de gel de filtração SEC e foi avaliado através do desempenho do kit EIEleishmaniose-visceral-canina-Bio-Manguinhos (EIE-LVC). Os conjugados foram produzidos com diferentes estequiometrias (IgG X peroxidase): conjugado atual, conjugado otimizado e conjugado otimizado e purificado. Resultados: A homogeneidade das médias dos conjugados no teste ELISA foi avaliada através do teste qui-quadrado, evidenciando assim a normalidade e confiabilidade dos dados. Com base nos dados estatísticos, amostras positivas obtidas pelo teste ELISA apresentaram homogeneidade ao nível de significância de 0,05, ou seja, grau de confiabilidade dos dados de 95%. A otimização da produção do conjugado anti-IgG canino, componente de suma importância utilizado na composição do Kit Bio-Manguinhos EIE LVC, contribuiu para assegurar a qualidade do kit e melhor diagnóstico da doença leishmaniose visceral canina, tornando-os mais sensíveis e de baixo custo para a saúde pública. Conclusões: Este trabalho demonstra que é possível otimizar o conjugado Anti-IgG Peroxidase Canina (HRP) utilizado no Kit EIE CVL, tornando-o mais específico e, em última análise, mais viável economicamente.</description><identifier>ISSN: 2317-269X</identifier><identifier>EISSN: 2317-269X</identifier><identifier>DOI: 10.22239/2317-269X.02299</identifier><language>por</language><ispartof>Vigilância Sanitária em Debate, 2024-10, p.1-8</ispartof><woscitedreferencessubscribed>false</woscitedreferencessubscribed><orcidid>0000-0001-6381-8924 ; 0009-0009-9659-9233 ; 0009-0004-3622-8119 ; 0000-0003-2216-8624 ; 0000-0003-0610-5324 ; 0009-0007-8577-7335 ; 0009-0009-8156-9752</orcidid></display><links><openurl>$$Topenurl_article</openurl><openurlfulltext>$$Topenurlfull_article</openurlfulltext><thumbnail>$$Tsyndetics_thumb_exl</thumbnail><link.rule.ids>314,776,780,860,27901,27902</link.rule.ids></links><search><creatorcontrib>De Amorim Chermont, Simone</creatorcontrib><creatorcontrib>Jorge Nascimento, Hilton</creatorcontrib><creatorcontrib>Lemos de Andrade, Marco Antonio</creatorcontrib><creatorcontrib>Teixeira Pinto, Christiane</creatorcontrib><creatorcontrib>Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos</creatorcontrib><creatorcontrib>Alves Brayner Pereira, Kaique</creatorcontrib><creatorcontrib>Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas</creatorcontrib><creatorcontrib>Fernandes Delgado, Isabella</creatorcontrib><title>Otimização do conjugado Anti-IGG canino no kit diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC): Vigil Sanit Debate, Rio de Janeiro, 2024, v.12: e02299| Publicado em: 11/10/2024</title><title>Vigilância Sanitária em Debate</title><description>Introduction: The diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) is of great importance in the control of visceral leishmaniasis, a disease that is neglected worldwide and represents a significant public health problem. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test is widely used because of the possibility of large-scale diagnosis and low cost. Objective: The objective of this study was to optimize the stoichiometry of the conjugate used in the EIE/CVL kit; for this purpose, some conjugation and monitoring parameters were modified through molecular exclusion chromatography to improve the final product. Method: The conjugate produced by Bio-Manguinhos was optimized by purification using SEC gel filtration chromatography and evaluated using the EIE-leishmaniasis-visceral-canine-Bio-Manguinhos kit (EIE-LVC). The conjugates were produced with different stoichiometries (IgG X peroxidase): current conjugate, optimized conjugate and optimized and purified conjugate. Results: The results obtained were validated using the manual Canine Visceral Leishmaniasis test. The homogeneity of the conjugate means in the ELISA test was evaluated using the chi-square test, thereby demonstrating the normality and reliability of the data. Based on statistical data, positive samples obtained by the ELISA test showed homogeneity at a significance level of 0.05, i.e. a data reliability level of 95%. The optimization of the production of the canine anti-IgG conjugate, an extremely important component used in the composition of the Bio-Manguinhos EIE LVC KIT, contributed to ensuring the quality of the kit and improving the diagnosis of canine visceral leishmaniasis disease, making it more sensitive and inexpensive for public health. Conclusions: This work demonstrates that it is possible to optimize the anti-IgG canine peroxidase (HRP) conjugate used in the EIE CVL kit to make it more specific and ultimately more economical.
Introdução: O diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) é de grande importância no controle da leishmaniose visceral, uma das doenças mais negligenciadas no mundo e de grande importância no campo da saúde pública. O teste Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) é amplamente utilizado pela possibilidade de diagnóstico em larga escala e baixo custo. Objetivo: Para otimizar a estequiometria do conjugado utilizado no kit EIE/CVL, foram modificados alguns parâmetros de conjugação e monitorização através de cromatografia de exclusão molecular no melhoramento do produto final. Método: O conjugado produzido por Bio-Manguinhos por purificação foi otimizado utilizando a cromatografia de gel de filtração SEC e foi avaliado através do desempenho do kit EIEleishmaniose-visceral-canina-Bio-Manguinhos (EIE-LVC). Os conjugados foram produzidos com diferentes estequiometrias (IgG X peroxidase): conjugado atual, conjugado otimizado e conjugado otimizado e purificado. Resultados: A homogeneidade das médias dos conjugados no teste ELISA foi avaliada através do teste qui-quadrado, evidenciando assim a normalidade e confiabilidade dos dados. Com base nos dados estatísticos, amostras positivas obtidas pelo teste ELISA apresentaram homogeneidade ao nível de significância de 0,05, ou seja, grau de confiabilidade dos dados de 95%. A otimização da produção do conjugado anti-IgG canino, componente de suma importância utilizado na composição do Kit Bio-Manguinhos EIE LVC, contribuiu para assegurar a qualidade do kit e melhor diagnóstico da doença leishmaniose visceral canina, tornando-os mais sensíveis e de baixo custo para a saúde pública. Conclusões: Este trabalho demonstra que é possível otimizar o conjugado Anti-IgG Peroxidase Canina (HRP) utilizado no Kit EIE CVL, tornando-o mais específico e, em última análise, mais viável economicamente.</description><issn>2317-269X</issn><issn>2317-269X</issn><fulltext>true</fulltext><rsrctype>article</rsrctype><creationdate>2024</creationdate><recordtype>article</recordtype><recordid>eNpjYJAwNNAzMjIyttQ3MjY01zUys4zQMzAysrRkYuCEi7AgsTkYeIuLswwMDAxNLcxMLQw5GZL9SzJzM6sSDy8_vDhfISVfITk_L6s0PRHIcswrydT1dHdXSE7My8zLVwCi7MwShZTMxPS8w5uLSzKTgRoSFXxSM4szcoFK8otTFcIyi5NTixJzFJxBehIVNHzCnDV5GFjTEnOKU3mhNDeDgZtriLOHbnJRfnFxUWpafEFRZm5iUWW8oUE82D_xIBfHg1wcD_aPMRlaAExDVAw</recordid><startdate>20241011</startdate><enddate>20241011</enddate><creator>De Amorim Chermont, Simone</creator><creator>Jorge Nascimento, Hilton</creator><creator>Lemos de Andrade, Marco Antonio</creator><creator>Teixeira Pinto, Christiane</creator><creator>Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos</creator><creator>Alves Brayner Pereira, Kaique</creator><creator>Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas</creator><creator>Fernandes Delgado, Isabella</creator><scope>AAYXX</scope><scope>CITATION</scope><orcidid>https://orcid.org/0000-0001-6381-8924</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0009-9659-9233</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0004-3622-8119</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0000-0003-2216-8624</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0000-0003-0610-5324</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0007-8577-7335</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0009-8156-9752</orcidid></search><sort><creationdate>20241011</creationdate><title>Otimização do conjugado Anti-IGG canino no kit diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC)</title><author>De Amorim Chermont, Simone ; Jorge Nascimento, Hilton ; Lemos de Andrade, Marco Antonio ; Teixeira Pinto, Christiane ; Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos ; Alves Brayner Pereira, Kaique ; Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas ; Fernandes Delgado, Isabella</author></sort><facets><frbrtype>5</frbrtype><frbrgroupid>cdi_FETCH-crossref_primary_10_22239_2317_269X_022993</frbrgroupid><rsrctype>articles</rsrctype><prefilter>articles</prefilter><language>por</language><creationdate>2024</creationdate><toplevel>online_resources</toplevel><creatorcontrib>De Amorim Chermont, Simone</creatorcontrib><creatorcontrib>Jorge Nascimento, Hilton</creatorcontrib><creatorcontrib>Lemos de Andrade, Marco Antonio</creatorcontrib><creatorcontrib>Teixeira Pinto, Christiane</creatorcontrib><creatorcontrib>Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos</creatorcontrib><creatorcontrib>Alves Brayner Pereira, Kaique</creatorcontrib><creatorcontrib>Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas</creatorcontrib><creatorcontrib>Fernandes Delgado, Isabella</creatorcontrib><collection>CrossRef</collection><jtitle>Vigilância Sanitária em Debate</jtitle></facets><delivery><delcategory>Remote Search Resource</delcategory><fulltext>fulltext</fulltext></delivery><addata><au>De Amorim Chermont, Simone</au><au>Jorge Nascimento, Hilton</au><au>Lemos de Andrade, Marco Antonio</au><au>Teixeira Pinto, Christiane</au><au>Chagas Bastos, Renata Chagas Bastos</au><au>Alves Brayner Pereira, Kaique</au><au>Barbosa Jurgilas, Patrícia Barbosa Jurgilas</au><au>Fernandes Delgado, Isabella</au><format>journal</format><genre>article</genre><ristype>JOUR</ristype><atitle>Otimização do conjugado Anti-IGG canino no kit diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC): Vigil Sanit Debate, Rio de Janeiro, 2024, v.12: e02299| Publicado em: 11/10/2024</atitle><jtitle>Vigilância Sanitária em Debate</jtitle><date>2024-10-11</date><risdate>2024</risdate><spage>1</spage><epage>8</epage><pages>1-8</pages><issn>2317-269X</issn><eissn>2317-269X</eissn><abstract>Introduction: The diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) is of great importance in the control of visceral leishmaniasis, a disease that is neglected worldwide and represents a significant public health problem. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test is widely used because of the possibility of large-scale diagnosis and low cost. Objective: The objective of this study was to optimize the stoichiometry of the conjugate used in the EIE/CVL kit; for this purpose, some conjugation and monitoring parameters were modified through molecular exclusion chromatography to improve the final product. Method: The conjugate produced by Bio-Manguinhos was optimized by purification using SEC gel filtration chromatography and evaluated using the EIE-leishmaniasis-visceral-canine-Bio-Manguinhos kit (EIE-LVC). The conjugates were produced with different stoichiometries (IgG X peroxidase): current conjugate, optimized conjugate and optimized and purified conjugate. Results: The results obtained were validated using the manual Canine Visceral Leishmaniasis test. 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Introdução: O diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) é de grande importância no controle da leishmaniose visceral, uma das doenças mais negligenciadas no mundo e de grande importância no campo da saúde pública. O teste Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) é amplamente utilizado pela possibilidade de diagnóstico em larga escala e baixo custo. Objetivo: Para otimizar a estequiometria do conjugado utilizado no kit EIE/CVL, foram modificados alguns parâmetros de conjugação e monitorização através de cromatografia de exclusão molecular no melhoramento do produto final. Método: O conjugado produzido por Bio-Manguinhos por purificação foi otimizado utilizando a cromatografia de gel de filtração SEC e foi avaliado através do desempenho do kit EIEleishmaniose-visceral-canina-Bio-Manguinhos (EIE-LVC). Os conjugados foram produzidos com diferentes estequiometrias (IgG X peroxidase): conjugado atual, conjugado otimizado e conjugado otimizado e purificado. Resultados: A homogeneidade das médias dos conjugados no teste ELISA foi avaliada através do teste qui-quadrado, evidenciando assim a normalidade e confiabilidade dos dados. Com base nos dados estatísticos, amostras positivas obtidas pelo teste ELISA apresentaram homogeneidade ao nível de significância de 0,05, ou seja, grau de confiabilidade dos dados de 95%. A otimização da produção do conjugado anti-IgG canino, componente de suma importância utilizado na composição do Kit Bio-Manguinhos EIE LVC, contribuiu para assegurar a qualidade do kit e melhor diagnóstico da doença leishmaniose visceral canina, tornando-os mais sensíveis e de baixo custo para a saúde pública. Conclusões: Este trabalho demonstra que é possível otimizar o conjugado Anti-IgG Peroxidase Canina (HRP) utilizado no Kit EIE CVL, tornando-o mais específico e, em última análise, mais viável economicamente.</abstract><doi>10.22239/2317-269X.02299</doi><orcidid>https://orcid.org/0000-0001-6381-8924</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0009-9659-9233</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0004-3622-8119</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0000-0003-2216-8624</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0000-0003-0610-5324</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0007-8577-7335</orcidid><orcidid>https://orcid.org/0009-0009-8156-9752</orcidid></addata></record> |
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