柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化

柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化

【目的】构建柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)含p23的RNAi载体,以获得具有抗性的柑橘转基因植株。【方法】基于转化病毒基因介导抗性,根据NCBI公布的CTV基因组序列,查找p23保守序列,设计并克隆两条不同长度的片段。对两条片段和植物表达载体p BI 121进行双酶切和连接来构建RNAi载体。初步预测所构建的载体发生RNAi抗病毒的可行性。利用农杆菌介导的瞬时表达技术将含RNAi载体的农杆菌注射入CTV指示植物墨西哥莱蒙的叶片,利用GUS组织化学染色法观察叶片中载体发生瞬时表达的情况。发生瞬时表达的叶片接种CTV T36基因型,利用酶联免疫反应(ELISA)...

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Veröffentlicht in:中国农业科学 2016 (20), p.3927-3933
1. Verfasser: 李芳 邓子牛 赵亚 李大志 戴素明
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
柑橘衰退病毒
p23
RNAi
大红甜橙
瞬时表达
遗传转化
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p20的积累水平和增加速度明显低于对照植株,表明瞬时表达的p23-RNAi在一定时间内可以对CTV的侵染产生抑制。p23-RNAi经农杆菌介导遗传转化大红甜橙获得抗性芽,通过普通PCR的扩增结果证明得到7个转基因植株;q-PCR检测结果进一步表明7个转基因植株间p23的含量呈现一定差异,植株E的含量最高,其次是C、F、H、A、B和G。接</description><subject>柑橘衰退病毒;p23;RNAi;大红甜橙;瞬时表达;遗传转化</subject><issn>0578-1752</issn><fulltext>true</fulltext><rsrctype>article</rsrctype><creationdate>2016</creationdate><recordtype>article</recordtype><recordid>eNpjYeA0MDW30DU0NzXiYOAtLs5MMjAwMjIzsjQz4GSweDZ_4rOVM14s3PCyoeH59NZn6yc9nb_r6ewFBUbGCkF-jpkv9u59snfy81ktz-a1PN2962l_14u9a572TONhYE1LzClO5YXS3AzGbq4hzh66yRn5eemFmXnp8QVFmbmJRZXxlgbmFhaW5qamBiYWJpamJmAaCE1NjcnTBQCUn0xQ</recordid><startdate>2016</startdate><enddate>2016</enddate><creator>李芳 邓子牛 赵亚 李大志 戴素明</creator><scope>2RA</scope><scope>92L</scope><scope>CQIGP</scope><scope>~WA</scope></search><sort><creationdate>2016</creationdate><title>柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化</title><author>李芳 邓子牛 赵亚 李大志 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