基于电喷雾电离质谱(ESI—MS)的丙酮稳定同位素标记对N-糖链的相对定量分析方法的研究
建立了一种基于电喷雾电离质谱的丙酮稳定同位素标记对N-糖链进行相对定量的研究方法.与传统的PNGaseF酶水解N-糖链的方法不同,采用非特异性蛋白酶PronaseE对N-糖蛋白进行处理,使N-糖蛋白被酶解为带有一个氨基酸的糖氨酸(Glycan-Asn),为N-糖链引入了一个氨基活性基团,然后用丙酮对氨基进行标记.用d0/d6丙酮对Ribo B标准糖蛋白的Pronase E酶解产物进行标记,考察了4对d0/d6丙酮标记的Glycan—Asn(Man5~Man8-Asn)在电喷雾电离质谱中的线性、动态范围以及重现性.结果表明,在10倍动态范围内,相对定量方法有良好的线性关系(R=0.9981)和重...
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Veröffentlicht in: | 化学学报 2014, Vol.72 (2), p.220-226 |
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Format: | Artikel |
Sprache: | chi |
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