黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及表达分析

肌肉生长抑制素（myostatin，MSTN）属于转化生长因子β（TGF-β）超家族中的一个成员，是骨骼肌生长发育的负调控因子。该文以黄河裸裂尻鱼肌肉总RNA为模板，采用RT-PCT、5＇-RACE和3＇-RACE法获得MSTN基因全长cDNA序列为2180bp，包含长为1128bp的开放阅读框，编码375个氨基酸。以肌肉总DNA为模板，通过PCR法进一步获得了MSTN基因的2个内含子序列，分析表明，黄河裸裂尻鱼MSTN基因与其他脊椎动物具有相似的基因结构（包括3个外显子和2个内含子）。黄河裸裂尻鱼MSTN具有脊椎动物MSTN的共同序列特征，含有1个蛋白酶水解位点RXXR和8个位于TGF-β功能区域保守的半胱氨酸残基。氨基酸序列同源性分析表明，黄河裸裂尻鱼MSTN序列与其他鲤科鱼类MSTN具有较高的同源性；而与哺乳动物和禽类的MSTN同源性较低。系统发育分析表明，黄河裸裂尻鱼MSTN与其他鲤科鱼类聚于同一进化支。RT-PCR分析表明，该基因在黄河裸裂尻鱼9个被检组织中均有表达，但在心、肾、肠、精巢中表达量较高。Real-TimePCR分析显示，MSTN基因在胚胎中的相对表达量，随胚胎发育阶段的不同而有所差异，暗示MSTN的功能可能并不局限在对肌肉生长发育的负调控作用，可能还有其他功能。