卡介菌CpG DNA复合佐剂-02系统（BC-C02）有效性与安全性评价
目的对卡介菌（BCG）CpG DNA复合佐剂-02系统（BC-C02）的有效性及安全性进行评价,为其应用提供研究基础。方法以流式细胞法检测经CpG DNA与细胞体外共培养后B细胞内TLR-9,巨噬细胞内IL-12、TLR-9表达,以酶联免疫斑点法检测人外周血单个核细胞（PBMC）经CpG DNA刺激后IL-12的分泌。单纯H1N1抗原低、中、高三个剂量组及三个剂量抗原添加CpG DNA后免疫小鼠,每组20只动物,免疫后测定其抗体效价及H1N1病毒感染后死亡率。经Mtb感染后豚鼠,以Ag85B＋BC-C02疫苗低、中、高组与BC-C02及生理盐水（NS）进行免疫治疗,每组10只豚鼠,观察动物脏器...
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| Veröffentlicht in: | 中国防痨杂志 2012, Vol.34 (3), p.161-167 |
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| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | chi |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Volltext |
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| creator | 赵爱华 李凤祥 寇丽杰 李长贵 乔来艳 王鹏 陈保文 徐苗 都伟欣 沈小兵 苏城 卢锦标 杨蕾 王国治 |
| description | 目的对卡介菌（BCG）CpG DNA复合佐剂-02系统（BC-C02）的有效性及安全性进行评价,为其应用提供研究基础。方法以流式细胞法检测经CpG DNA与细胞体外共培养后B细胞内TLR-9,巨噬细胞内IL-12、TLR-9表达,以酶联免疫斑点法检测人外周血单个核细胞（PBMC）经CpG DNA刺激后IL-12的分泌。单纯H1N1抗原低、中、高三个剂量组及三个剂量抗原添加CpG DNA后免疫小鼠,每组20只动物,免疫后测定其抗体效价及H1N1病毒感染后死亡率。经Mtb感染后豚鼠,以Ag85B＋BC-C02疫苗低、中、高组与BC-C02及生理盐水（NS）进行免疫治疗,每组10只豚鼠,观察动物脏器结核病变指数。同时分别检测CpG DNA注射小鼠后IgE产生和复合佐剂BC-C02注射豚鼠后全身过敏毒性。结果BC-C02中的生物佐剂可刺激B细胞增殖[佐剂组CD19＋%为41%,培养基对照组（NCS）组为27%;t=-4.40,P〈0.05];促进B细胞内TLR-9表达（佐剂组CD19＋TLR-9＋%为2.8%,NCS组为1.1%;t=-5.92,P〈0.05）;上调巨噬细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达（佐剂组F4/80＋I-A/I-E＋%为82%,NCS组为31%;t=-4.32,P〈0.05）;可促进巨噬细胞内TLR-9和IL-12的分泌（佐剂组F4/80＋I-A/I-E＋TLR-9＋IL-12＋%为2.1%,NCS组为0.1%;t=4.80 P〈0.05）。BC-C02中的生物佐剂作为H1N1疫苗佐剂,在检测时间内（5、7、14、28d）,PBS组4个时间点血凝抑制（HI）抗体滴度均〈10;H1N1低剂量组滴度〈中剂量组滴度〈高剂量组滴度,抗原复合CpG组均高于单纯抗原组,且佐剂可促进抗原特异性IgG2a的提高。H1N1保护力实验中,PBS组、H1N1低剂量组、H1N1低剂量＋CpG DNA组、H1N1高剂量组、H1N1高剂量＋CpG DNA组存活率分别为30%、50%、90%、100%、100%,显示佐剂可提高40%动物存活率。Mtb潜伏感染动物经疫苗治疗后,对照组动物100%病变,疫苗组完全转阴的动物达到30%,而且病变指数〈30的动物达到60%～70%。佐剂注射小鼠后IgE抗体与NS无区别,豚鼠过敏毒性试验显示佐剂不会引起动物全身过敏反应。结论BC-C02既能诱导细胞免疫反应,也能诱导体液免疫反应,并能提高疫苗保护 |
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