千层塔中Ⅲ型聚酮合酶基因的克隆、表达与功能鉴定

Ⅲ型聚酮合酶是以合成聚酮类化合物为主的一类重要生物合成酶。本文利用逆转录聚合酶链反应从中草药千层塔新鲜嫩叶中扩增聚酮合酶基因,得到一个Ⅲ型聚酮合酶全长cDNA。该基因全长1212 bp,编码404个氨基酸。与已知的其他植物来源的聚酮合酶氨基酸序列有约50%~66%的同源性。cDNA经双酶切后克隆至pQE81L,并导入大肠杆菌(E.coli)M15中表达,产生大量带寡聚组氨酸标记的重组酶,重组酶分子质量大小约为46.4 kDa。酶活性鉴定研究表明,该重组酶可催化芳香族底物、脂肪族底物生成系列非天然聚酮产物,尤其是其可催化N-甲基邻氨基苯甲酰CoA和丙二酰CoA生成1,3-二羟基-N-甲基-吖啶酮...

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Veröffentlicht in:药学学报 2011, Vol.46 (10), p.1273-1278
1. Verfasser: 叶金翠 张萍 孙洁胤 郭潮潭 陈国神 阿部郁朗 野口博司
Format: Artikel
Sprache:chi
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Online-Zugang:Volltext
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